(二)凝集试验
某些病原微生物和红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后,在适量电解质存在的情况下,出现肉眼可见的凝集小块,称为凝集反应。根据这一原理建立的凝集试验,在临床免疫学检验中应用颇多。如直接凝集试验(玻片法、玻板法、试管法),间接凝集试验(间接红细胞凝集试验、间接乳胶凝集试验、间接碳凝集试验),.病毒血凝和血凝抑制试、抗球蛋白凝集试验等。
(三)病毒中和试验
病毒与相应的抗体相结合时,抗体可阻止病毒吸附于宿主细胞,从而抑制病毒感染组织培养细胞或活体细胞,这种反应称为病毒中和试验,这种抗体称中和抗体。培养的细胞、鸡胚和实验动物均可用作宿主细胞。用培养细胞做病毒中和试验时,以细胞培养物是否出现细胞病变、能否吸附红细胞及蚀斑减少等作为指示,测定中和抗体。用鸡胚做病毒中和试验时,以鸡胚的生死和羊水、尿囊液是否具有红细胞凝集性及绒毛尿囊膜上是否生成痘斑作为指示,测定中和抗体。用实验动物做病毒中和试验时,根据动物的生死和发病作为指示,测定中和抗体。病毒中和试验用于多数病毒性疾病的诊断也可用于病毒的鉴定。
另外,病毒中和试验用于毒素与抗毒素检测,将抗毒素和相应毒素以适当比例混合后,接种于易感实验动物。通过观察能否保护易感动物免于死亡或有无毒性反应出现,可鉴定产气荚膜梭菌等毒素.
(四)补体结合试验
补体结合试验是可溶性抗原和相应的抗体结合时,补体非特异性地结合于抗原抗体复合物而被消耗。这种反应肉眼见不到,要以绵羊红细胞和溶血素(抗绵羊红细胞抗体)作为指示系统共同孵育,根据有无溶血现象出现,检查被检系统中有无相应的抗原抗体存在的一种血清学试验。常用已知抗检測未知血清,也可以用已知血清检测未知的相应抗原。如果不出现溶血反应,则补体结合反应结果为阳性。这种方法广泛应用于细菌、病毒、立克次氏体及原虫等引起的各种家畜传染病诊断。
(五)与标记抗体有羊的试验
包括荧光抗体试验( FAD)、酶联免疫吸附试验( EIISA)。
1.荧光抗体试验 将抗体或抗原标记上荧光素(常用的主要有异硫氰酸荧光黄、四乙基罗丹明等),与相应的抗原或抗体发生特异性结合,在荧光显微镜下可看到发出荧光的抗原—抗体反应,从而可对标本中相应抗原或抗体进行鉴定和定位.
2.酶联免疫吸附试验.是根据抗原抗体反应的特异性和酶催化反应的高度敏感性,而建立起来的免疫检测技术,分为固相酶联免疫吸附试验和酶免组织化学技术。
EI+ISA法具有极高的敏感性,常用于抗原和抗体检测,其应用于细菌、病毒真菌或寄生虫等疾病的诊断。酶免疫组织化学技术是利用酶标记抗体作为组织或细胞内抗原或抗体定位的标记物,在光镜下进行细胞(涂片、压片及培养细胞)或普通组织Cr片抗原或抗体定位。