(一)细菌学检查
鼻外部消毒后,用无菌棉拭子插出鼻腔中较深的部位,轻轻滚动几回,使其沾上黏液或分泌物,立刻放人装有肉汤的小试管中,塞紧管塞,送检。也可直接无菌采取鼻腔后部、支气管的分泌物及肺组幻等
4h内进行细菌分离培养,可应用改良马丁琼脂(含牛裂解血球液1%、牛血清2%、盐酸洁霉素I Ug/mL,硫酸新霉素1.9卜g/mL)平板和血红素痢特灵改良麦康凯琼脂(彭发泉等1986)平板,37℃培养18h分离Pm,培养44h分离Bbo Bb分离株依据菌落特征和平板凝集反应加以鉴定,Bb37C培养24h,菌落呈针尖大小;48h菌落为/mm大,呈灰褐色,半透明状、隆起、光滑,有特殊霉臭味、、涂片、染色、镜检。革兰染色,—可见到革兰阴性小杆菌,有两极着色的趋势。
(二)Pm分离株的产毒素能力检查
采用豚鼠皮肤坏死试验( Dejong, M.F.1980)进行。用马肉汤37℃培养36h的菌液O.lmL打针于体重350g的健康豚鼠背部皮内,观察72h。皮肤泛起直径大于0.5cm以上的坏死区为阳性反应(DNr),无反应或仅一过性红肿为阴性( DNT- )。
(三)X射线摄片检查
摄片时胶片贴在病猪的硬腭。X射线从鼻背向鼻腔投照,片上即可显示黏膜和鼻甲骨的变化,这种方法已在一些国家广泛应用,但在解释射线照片时,碰到很多灾题和题目。这种方法不能检出带菌猪,也不能可靠地检出稍微的病变。检查前必需对猪进行镇定、麻醉或做机械性保定,而且费时费钱。
(四)血清学试验
猪血清中可检出支气管败血波氏杆菌的凝集抗体,但其诊断价值很小,猪感染本病后2-4周,血清中即泛起凝集抗体,至少维持4个月。但一般感染仔猪须在12周龄后才可以检出此种抗体。目前,还没有血清学实验能可靠的检出多杀性巴氏杆菌的感染。
凝集试验抗原可用每毫升含菌25004乙的l相菌,:平板凝集试验使用抗原原液,被检血清不需灭活,两者等量混合后,在室温2min内泛起“廾+”以上的凝集者为阳性反应;试管凝集试验应将抗原稀释成is042个/mL菌,被检血清56℃灭活30min,分列稀释,两者等量混合后,于37℃放置18-20h,再于室温放置2h判断结果,1:10以上“升”判为阳性反应。
(五)病理解剖学诊断
是目前诊断AR最实用的方法。一般在鼻黏膜、鼻甲骨等处可以发现典型的病理变化。剖检有两种方法:一是沿两侧第一、二对前臼齿间的连线锯成横断面,观察鼻甲骨的外形和变化。在这个部位的横切面上,正常的鼻甲骨显著地分为上、下两个卷曲。上卷曲呈现两个完全的弯转,而下卷曲的弯转则较少,仅有一个或1/4弯转,有点像钝的鱼钩。上下卷曲几乎占据整个鼻腔。下鼻道比中鼻道稍大,鼻中膈朴重。当鼻甲骨萎缩时,卷曲变小而钝直,甚至消失。但应留意,假如横切面锯得太前,因下鼻甲骨卷曲的外形不同,可能导致误诊。二是沿头部正中线纵锯,再用利剪刀把下鼻甲骨的侧连接剪断,取下鼻甲骨,从不同的水平作横断面,进行观察和比较。这种方法较为费时,但采集病料时不易污染。
(六)类症鉴别
应留意与传染性坏死性鼻炎、骨软病、猪传染性鼻炎、猪细胞巨化病毒感染等相鉴别。传染性坏死性鼻炎由坏死杆菌引起,主要发生于外伤后感染,引起软组织及骨组织坏死、腐臭,并形成溃疡或瘘管;骨软病表现头部肿大变形,但无喷嚏和流泪症状,有骨质松散变化,鼻甲骨不萎缩。