当前，饲料安全问题已成为全球关注的重要议题，而有害微生物污染也成为饲料安全中的一项主要控制指标。饲料厂有害微生物主要有有害细菌、霉菌、大肠菌群等，它们对饲养动物和动物源性食品危害很大。饲料生产企业在生产过程中普遍存在有害物质，包括有害微生物的交叉污染。要控制饲料原料、产品中有害微生物，第一 必须要有能够准确快速的有害微生物捡测方法。经典的标准检测方法往往比较费时，所以有害微生物快速检测方法成为近年来的研究热点。本文根据近年来国内外已发表的研究文献，总结有害微生物快速检测方法的研究进展，供参考。5wc中国养猪网-立足饲料，服务畜牧

　　1 饲料中有害微生物快速检测方法研究进展5wc中国养猪网-立足饲料，服务畜牧

　　1.1 生物传感器技术5wc中国养猪网-立足饲料，服务畜牧

　　生物传感器(biosensor)是指对生物物质敏锐 并能将其浓度转换为电信号进行检测的仪器;生物传感器又分为：酶生物传感器、微生物传感器和免疫传感器。它们具有成本低、体积小、灵敏度较高的优点;能从腐败或者半腐败的食品、饲料中得来 实时而快速、多样化的估量 检测结果。5wc中国养猪网-立足饲料，服务畜牧

　　张杰等利用生物素——亲和素系统将分子马达与探针连接构建了F0F1——ATPase分子马达生物传感器，它能对副溶血性弧菌特异性识别，最低检测限为1pg/反应体系，对其致病性进行快速诊断，无需热循环反应，检测周期缩短，整个估量 过程只需1h——2h，不需酶切及电泳等繁琐操作。5wc中国养猪网-立足饲料，服务畜牧

　　张捷等通过生物素——亲和素系统将特异性沙门氏菌特异性基因(invA，作为其目的基因片段)核酸探针连接在F0F1——ATPase的ε亚基上构建生物传感器;将待测样品和阴性对照分别与生物传感器结合后，比较其催化三磷酸腺苷(ATP)合成30min后的ATP产生量，依此对样品中的沙门氏菌DNA进行检测。该方法对沙门氏菌DNA的检测时间为1h，检出限为10ng/ml。从估量 样本分离得来 的30株细菌，利用分子马达生物传感器的检测结果与PCR 检测的结果一致。5wc中国养猪网-立足饲料，服务畜牧

　　Kim等为了提高传感器对单增李斯特菌的估量 检测能力，设计了与实时的估量 系统相连结的IMC模块(immuno——magnetic concentration)。生物传感器技术大大缩短了检测时间，可在数小时甚至数分钟内查出致病微生物，为微生物的快速检测提供了一种有效的工具。但该法在预处理方面受来 某些限制。5wc中国养猪网-立足饲料，服务畜牧

　　1.2 基因芯片技术5wc中国养猪网-立足饲料，服务畜牧

　　基因芯片技术是在生命科学领域迅速发展的新型食源性检测技术。该法把微电子光刻技术与DNA化学合成技术相结合，大大提高了基因芯片的探针密度，且试剂用量减少，可以实现标准化和批量化大规模生产，有很大的发展潜力。将基因芯片技术与其它技术结合起来，能来 达更好的成效。5wc中国养猪网-立足饲料，服务畜牧

　　戈海泽等根据生物信息学技术以细菌16SrDNA和23SrDNA序列设计各细菌的特异型探针和引物，在基因芯片制备基础上，通过对靶基因的扩增、杂交和对杂交结果的估量 ，对常见肠道致病菌的检测和鉴定成效进行评判 ，同时对临床摘 集100份腹泻患者粪便标本进行细菌培育。在100份临床粪便标本中，摘 用基因芯片技术共检出50份(50%)携带肠道致病菌;细菌培育鉴定出47份(47%)携带肠道致病菌，其中42份基因芯片与细菌培育结果一致，准确率为79.25%，与细菌培育结果比较差异无据统计学意义(P>0.05)。该该法具有高通量、高准确性和高灵敏度，检测时间短，可同时检测多种有害微生物，可以作为临床鉴定细菌的一个重要的方法。将广泛应用于食品饲料安全控制，突发性食品安全事件检测，出入境检验检疫等，但检测费用昂贵。5wc中国养猪网-立足饲料，服务畜牧

　　1.3 聚合酶链式反应技术5wc中国养猪网-立足饲料，服务畜牧

　　聚合酶链式反应(PCR)是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，具有特异性强、灵敏度高、简便快速和对标本的纯度请求低等优势;不过检测样品较多时工作量大。在食品安全越来越严肃 的形式下，许多科技工作者试图多种检测方法联用，来 达解决上述问题的目的。将多种检测方法联用，旨在补偿 单一检测方法的局限性。目前国际上研究的热点有多重荧光实时PCR检测技术，兼具多重PCR和荧光实时PCR技术的实时定量检测监控PCR产物两方面的优点。5wc中国养猪网-立足饲料，服务畜牧