尾部采样方法在非洲猪瘟样品采集中的应用

来源：赵宝凯耿健抗非大家谈 2021-09-16 14:33:44| 查看：次

　　非洲猪瘟疫情发生3年多以来给养猪行业带来了很大的变化，猪场生物安全防控技术、猪场临床检测技术等均取得了进步。在非洲猪瘟日常监测及非洲猪瘟定点清除过程中都离不开样品采集，但是由于现场工作人员水平参差不齐，猪只采样量大，常有因采样不当出现非洲猪瘟病毒污染面扩大、采样不确实等情况，造成非洲猪瘟防控失败，造成重大损失。因此本文就现场中应用的尾部采样方法进行介绍，便于猪场在非洲猪瘟防控工作中实施，以减少不必要的损失。

　　一、尾部血拭子采样

　　检测是非洲猪瘟防控中重要的一环，采样的科学性、规范性不仅仅影响检测的结果，还可能影响到猪场的安危。在非洲猪瘟病原检测过程中，口鼻拭子和血拭子是两种最常用的采样方法。

　　血拭子与口鼻拭子相比，具有病毒载量高、不易失活、受外界影响小、采样确实等优点而被广泛应用。特别是非洲猪瘟野毒阳性场定点清除过程中，口鼻拭子在采集过程中容易造成交叉污染，也会因操作不当出现阳性猪漏检的情况。当感染猪只未表现出临床症状时，口鼻拭子与血拭子相比抗原阳性检出时间早24小时左右。而对于已经出现临床表现症状的猪只，口鼻拭子和血拭子中均可检出，口鼻拭子检测ct值为35～40，而血拭子检测ct值为25～35（表1），相比口鼻拭子，血拭子采样更确实，因而少有假阴性的出现，所以对于非洲猪瘟野毒感染定点清除检测时，推荐使用血拭子进行样品的采集。

　　表1血拭子和口鼻拭子检测结果对比

　　血拭子虽然有以上诸多优点，但血液中病毒载量高，如果操作不当易造成散毒的风险，因此在采集血拭子过程中，如何避免散毒和交叉污染就成为采样过程中的关键点。猪场血拭子采集往往在两个位置进行，分别是耳缘静脉或尾根静脉部位，耳缘静脉在采血拭子时需要对猪进行保定，保定过程和采样过程容易导致交叉污染，并且要求至少两人以上配合完成，不适用于感染猪监测和定点清除期间使用。

　　针对尾根血拭子推荐改进后的无接触尾根血拭子采样方法（视频1），仅需使用针在尾部上方距离尾根2cm处刺破即可，整个过程人员手臂等部位不需接触猪只和猪栏，且这个位置的出血量正好符合血拭子采血量，采样完成后使用液体创可贴即可立即消毒止血，不易出现大量出血。本方法易学易会，一个熟练的技术员每分钟可采10头以上，更适合用于非洲猪瘟日常监测及定点清除过程（表2）。

　　视频1尾根血拭子采样方法

　　表2不同类型拭子采样方法比较

　　二、尾部静脉全血采样

　　在非瘟疫苗毒感染场确诊和定点清除过程中、野毒感染定点清除后和引种前都需要对非洲猪瘟抗体进行检测，以确定净化成功和引进的种猪未感染过非洲猪瘟。抗体检测要求对猪只进行血液样品的采集，分离血清。常规猪采血方法大多数为前腔静脉采血和耳缘静脉采血，这两种采血方式均需对猪进行保定，同时需要在猪的前方进行操作，不仅给猪造成巨大应激，还容易造成病毒扩散。

　　改进的尾根静脉全血采样方法（视频2），采血时不需对猪进行保定，整个过程在猪后方进行操作，使用采血针扎入尾根静脉处，见回血后将采血针的另一侧插入真空负压管中，即可完成血液的采集，采血完成后可用液体创可贴进行止血。整个采样过程中对猪的应激小，采样快，一人即可完成，同时不会因为人员采样操作导致疾病扩散，适用于定位栏猪群抗体检测（表3）。

　　视频2尾根静脉全血采样方法