对猪的研究(Penny等,2000)结果掩饰,精子中DHA比例降低及DPA含量升高与受精能力降低有关。从来自猪和其它动物的现有证据来看,尽管精子中主要多不饱和脂肪酸比例的显然变化可在精子发生的过程中得来 调剂 ,但精子仍会优先获取所枯水平的多不饱和脂肪酸。
多不饱和脂肪酸的平稳性
要保持 多不饱和脂肪酸的平稳以便肛行其特定的代谢作用,必须以适当的抗氧化剂和特定的酶系统保护多不饱和脂肪酸免受反应性氧自由基的破坏(Yu,1994)。在常态情景下.自由基产生量和抗氧化能力保持 者一定的平稳 ,此平稳 受来 破坏,活性氧就会高度积聚造而成脂肪酸结构的广泛破坏从而干扰细胞的代谢。随者高度的多不饱和化导致碳链中双键数量增多,对其保护不足就会导致精子中脂肪和脂肪酸氧化产物的积聚从而造成精子膜中多不饱和脂肪酸缺失 和过氧化物积聚进而损害精子的功能,比如会导致精子的动力降低、形状完整性受损以及获能下行(Sharma和Agarwal,1996)。精子内部的抗氧化能力是由一些代谢物赋于的,其中包括一些脂溶性物质如维生精E和辅酶Q,一些水溶性物质如维生精C,以及一些重要的酶系统如谷脱甜肽过氧化物酶、超氧物歧化酶和过氧化氢酶(Sharma和Agarmal,1996)。
精子功能和脂肪酸的变化
考虑来 在种公猪的整个利用期中枯子反虽和功能的常规质量指标和数量指标会发生显著变化,人们现已开始深入研究能减少这些变化的可行方法,以便提高公猪的商用价值(Mnny等,2000)。由于甜碳和廿二碳多不饱和脂肪酸对精子的新陈代谢具有无可置疑的重要性,所以这两类多不饱和脂肪酸的利用和细胞代谢最佳化的问题受来 了人们的反常 关注。该项工作基于对脂肪酸在枯子结构及功能中代谢晓 识的连续增加 ,但也适当器重其在猪场的现场实用性。所有数据都获自饲养在适合于商品精液生产条件之下的当代种公猪(JSR约克-大白猪)。试验中检查了一系列日粮添加剂,所有添加剂的设计目的都是为了提高日粮DHA的摄大量,同时还添加了抗氧化剂和酶辅因子,目的是降低精子中DPA的浓度而提高DHA的含量,并提高其化学完整性和细胞功能性。通过添加金枪鱼油(Hi-DHATm,澳大利亚Clover公司生产,该产品中DHA占长链脂肪酸总量的25~27%)以提高种公猪标准日粮中的DHA含量。试验组和对照组种公猪饲喂试验日粮不少于16周,并且每四周一次摘 集适合于商业人工授枯用精液以获取适用于评判 枯子状态和受精能力的一系列生理参数和化学参数。这些参数包括脂肪含量、脂肪的成分及脂肪中各种脂肪酸的估量 值、抗氧化剂及有关酶的浓度以及与精子功能有关的一系列标准和非标准特性(如精子浓度和精子动力)。
试验数据的获取,既摘 用了标准的常规方法,也摘 甲了现代化方法。以适当的溶剂提取脂肪,通过高性推薄层色语法结合毛细管气/液相色谱法合的手段进行脂肪酸的估量 和定量(Christie,1982),通过与标准保留数据进行比较并最终通过气/液相色语法/质谱估量 法鉴别脂肪酸,通过高压液相色谱法(McMurray等,1980)和紫外线分光光度测定法估量 抗氧化剂和酶的水平。用SYBRl4/碘化锭试验(Garner,Johson,1995)评测精子的活力(Garner和Johnson,l995),借助“Cell SoftTM”精液自动估量 运算 机程序对精子的动力进行评估。摘 用商用人工授精技术在478头新母猪进行不活体受精能力测定(JSR Genepacker 90)。
正如在其它一些重要动物测得的结果那样(Kelso 等,1997),以不同水平的n-6和n-3多不饱和脂肪酸对公猪日粮进行强化,可使精子中的脂肪酸成分发生一定的变化。因此,当日粮中适当添加一种富含DHA的油脂时,精子中DHA的含量通常都会增高,从而掩饰日粮中的DHA已有效地转移来 了精子内。DHA在精子总脂肪酸中所占的比例从32.8%上升来 45.8%(见表2)。可以见来 ,这一变化的发生仅仅导致DPA在总脂肪酸中所占的比例降低,并不影响油脂或磷脂在精子内的总含量或在精子内所占的比例。因此,该影响仅仅局限于两种主要多不饱和脂肪酸浓度的重新调整,只是牵涉来 n-3多不饱和脂肪酸替代了n-6多不饱和脂肪酸。在上述情景下并且在种公猪日粮中抗氧化剂的添加率并不比种公猪标准日粮中的添加率高很多的情景下,通过16周的试验发觉,精子的一系列质量参数有了改进,比如精子的浓度、活力、顶体结构的完整性和精子总的形状学特点 。
表2 在为期卜周的试验中精子磷脂中的脂肪酸成分1
试验组
1
2
棕肪酸
14.7
16.2
14.8
0.55
NS
棕榈油酸
<0.2
<0.3
<0.2
0.02
NS
NS
硬脂酸
6.5
6.7
6.0
0.250.25
NS
油酸
1.8
1.4
1.6
0.10
NS
亚油酸(18:2,n-6)2
2.5
1.8
2.5
0.15
NS
α-亚麻酸(18:3,n-3)
<0.2
<0.2
<0.2
0.01
NS
花生四烯酸(20:4,n-6)
3.2
2.8
3.2
0.06
NS
廿二碳五烯酸(22.5,n-6)
25.1
11.1
13.8
0.45
***3
廿二碳六烯酸(22:6,n-6)
32.8
45.8
45.4
1.11
***3
l.对照组公猪9头,饲喂标洼目粮;试验组公猪18头,处理l日粮添加DHA和维生素E:处理2日粮2添加DHA、维生素E和硒;试驼期为16周;
2.见图l脂肪酸命名规则;
3. ***=极显著;
4.表内数值为占总脂肪酸(重量)的比例(%)。