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猪伪狂犬病的分子生物学技术

来源:中国养猪网 2010-10-19 14:48:34| 查看:

猪伪狂犬病的分子生物学技术[/page] 

1.核酸抹针检测技术  用斑点杂交法应用32P标记PRV全基因组DNA和重组质粒作探针检测细胞培养物中的PRV-DNA,均能检测lOpgPRV-DNA,且有较高特异性。魏伟等.用光敏生物素标记PRV特异性糖蛋白GP50克隆重组颗粒PUP作为探针,检测实验感染乳猪15头份,证明通过PCR和分子克隆技术制备的PRV特异性糖蛋白基因片段的光敏生物探针,能有效地用于检测伪狂犬病。

2PCR技术 应用PCR技术对PRV进行基因扩增,均获得了特异敏感的结果。

诊断实践中应当了解各种诊断方法的价值。病理组织学检查采取可疑病例脑脊髓组织切片,做苏木素一伊红染色,在伴有非化脓性淋巴细胞性脑炎和脑脊髓神经节炎的情况下,神经细胞、胶质细胞和毛细血管内皮细胞内可检出A型核内包涵体。

免疫荧光试验取自然病例的病料(或组织细胞培养物),如脑的压片或冰冻切片,用直接免疫荧光检查,可于神经节细胞的胞浆及核内产生荧光,几小时后可取得可靠的结果。

病毒分离可以用病料直接接种猪肾细胞或鸡胚细胞,病毒繁殖后,可出现典型的细胞病变。另外也可用被检的猪肾来制备细胞,用新出芽生长的细胞做指示细胞,或者将被检猪肾细胞组织剪碎,与指示细胞混在一起培养,可观察到病变。通过以上方法得到的假定阳性培养液,要通过病毒中和试验来鉴定。

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