猪伪狂犬病的分子生物学技术

来源：中国养猪网 2010-10-19 14:48:34| 查看：次

猪伪狂犬病的分子生物学技术[/page]

1．核酸抹针检测技术用斑点杂交法应用32P标记PRV全基因组DNA和重组质粒作探针检测细胞培养物中的PRV-DNA，均能检测lOpg的PRV-DNA，且有较高特异性。魏伟等．用光敏生物素标记PRV特异性糖蛋白GP50克隆重组颗粒PUP作为探针，检测实验感染乳猪15头份，证明通过PCR和分子克隆技术制备的PRV特异性糖蛋白基因片段的光敏生物探针，能有效地用于检测伪狂犬病。

2．PCR技术应用PCR技术对PRV进行基因扩增，均获得了特异敏感的结果。

诊断实践中应当了解各种诊断方法的价值。病理组织学检查采取可疑病例脑脊髓组织切片，做苏木素一伊红染色，在伴有非化脓性淋巴细胞性脑炎和脑脊髓神经节炎的情况下，神经细胞、胶质细胞和毛细血管内皮细胞内可检出A型核内包涵体。

免疫荧光试验取自然病例的病料（或组织细胞培养物），如脑的压片或冰冻切片，用直接免疫荧光检查，可于神经节细胞的胞浆及核内产生荧光，几小时后可取得可靠的结果。

病毒分离可以用病料直接接种猪肾细胞或鸡胚细胞，病毒繁殖后，可出现典型的细胞病变。另外也可用被检的猪肾来制备细胞，用新出芽生长的细胞做指示细胞，或者将被检猪肾细胞组织剪碎，与指示细胞混在一起培养，可观察到病变。通过以上方法得到的假定阳性培养液，要通过病毒中和试验来鉴定。

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