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蓝耳病病毒的分离与鉴定

来源: 中国养猪网   2010-10-18 16:13:48   查看:  次

蓝耳病病毒的分离与鉴定[/page] 

  目前多将猪原代肺泡巨噬细胞、CL2621细胞系和Marc145细胞用于该病毒培养的分离。

细胞培养法:病毒分离样品选择和采取的所有操作应为无菌规程进行。用免疫组化技术检查发现,病毒存在于病猪的肺泡巨噬细胞,细支气管上皮、肺泡上皮细胞,脾脏的红髓及边缘区的巨噬细胞内。①病毒分离的首选材料是肺、扁桃体、脾、淋巴结和血清,死产和流产胎儿的脾肺血清和胸水是适宜的检验材料,弱胎猪和有呼吸道症状的急性感染猪的检出率最高。②常用细胞培养法的细胞系:已知PRRS病毒能在猪肺泡巨噬细胞(PAM)、传代细胞CL2621Marc145等细胞系生长。(③病毒的镐取流产胎儿,新生仔猪的肺、脾、肝、肾、心、脑、扁桃体、支气管、淋巴结、胸腺和骨髓匀浆制成悬液,进行分离病毒。用含抗生素的维持液(含2%胎牛血清随MEM营养液)做110稀释,4500r/min离心30min,经0.45nm滤膜过滤,上清用MEMl30稀释,接种于猪肺泡巨噬细胞(PA M)CL2621MA104细胞单层,于35q:吸附24h,加含4%胎牛血清的

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