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蓝耳病病毒的分离与鉴定

来源：中国养猪网 2010-10-18 16:13:48| 查看：次

蓝耳病病毒的分离与鉴定[/page]

目前多将猪原代肺泡巨噬细胞、CL2621细胞系和Marc145细胞用于该病毒培养的分离。

细胞培养法：病毒分离样品选择和采取的所有操作应为无菌规程进行。用免疫组化技术检查发现，病毒存在于病猪的肺泡巨噬细胞，细支气管上皮、肺泡上皮细胞，脾脏的红髓及边缘区的巨噬细胞内。①病毒分离的首选材料是肺、扁桃体、脾、淋巴结和血清，死产和流产胎儿的脾肺血清和胸水是适宜的检验材料，弱胎猪和有呼吸道症状的急性感染猪的检出率最高。②常用细胞培养法的细胞系：已知PRRS病毒能在猪肺泡巨噬细胞(PAM)、传代细胞CL2621和Marc145等细胞系生长。（③病毒的镐取流产胎儿，新生仔猪的肺、脾、肝、肾、心、脑、扁桃体、支气管、淋巴结、胸腺和骨髓匀浆制成悬液，进行分离病毒。用含抗生素的维持液（含2%胎牛血清随MEM营养液）做1：10稀释，4500r/min离心30min，经0.45nm滤膜过滤，上清用MEM做l：30稀释，接种于猪肺泡巨噬细胞(PA M)或CL2621、MA104细胞单层，于35q：吸附24h，加含4%胎牛血清的

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