撰文:铁骑力士集团猪业事业部
育种部经理王忻(动物遗传育种与繁殖博士)
公猪的科学管理是生产高品质精液的基础,但精液是否可以正常用于配种的另一个关键要点是实验室是否管理科学、运转正常。
因此,公猪站实验室的管理流程必须正确、精准,公猪站实验室里的所有步骤都必须按照标准的流程进行操作,包括准确的精液品质评估、原精稀释、水质管理、精液稀释以及实验室的卫生保持。所有这些都需要做到标准操作,以确保精液品质良好,最大化的发挥公猪的价值。
01
实验室工作流程
实验室工作流程设计是影响实验室技术人员效率、公猪精液品质的重要因素。实验室工作人员必须穿戴专门的工作服及发套,并且在进入实验室之前必须洗手消毒。为了避免人员造成交叉污染,实验室的操作流程需要设置为单向流动(下图)。
精液在采集后到稀释的时间要尽可能的缩短。原精在采集后应在15分钟内对精液进行品质分析并稀释。如果不能在15分钟内完成分析,可以采用如下的方法进行处理: 用相同温度的稀释液对原精进行稀释,稀释比例一般在1:1~1:3,处理后需要尽快进行分析并稀释。
02
精液评估
原精密度检测是精液评估过程中的第一步,检测结果的准确性也直接影响后续的工作。原精密度的正常范围在2亿~6亿/毫升, 如原精密度低于1亿/毫升,则原精需要丢弃。原精密度的检测有多种方法,包括血红细胞计数板法、精液密度分析系统、光度计检测等。在检测前,可以使用显微镜进行评估,主要评估原精是否达标。除密度外,原精的理化、感官指标也非常重要,可以间接反应精液的品质高低。表1为精液评估的要素介绍。
03
精液活力评估
精液的活力反应精子的运动能力,而有运动能力的精子细胞比例,直接影响后续的受胎分娩率及产仔数。配种要求的精液活力至少需要达到70%,而原精稀释后每过24小时,精液活力将产生2%~3%的损失,因此原精的活力至少要达到80%。为了正确地得到活力评估结果,评估需要对精液预热到37-38℃进行。
除了精液活力外,对精子的形态学检查也是非常重要的。可使用具有自动形态学检测的精液分析系统或通过显微镜目测方法评估精子形态特征。计数和评估至少100个精子细胞,以估计精液中异常精子比例(表2),用于评估的精子细胞越多则结果越接近实际值。需要关注的异常情况包括:头部缺陷(包括顶体)、原生质滴(远端原生质滴和近端原生质滴)和尾部缺陷(表3)。
04
实精液稀释液水质
精液稀释工作需要大量、可靠的纯净水用于稀释液配制等工作。水的质量会直接影响稀释后精液的品质和保存时间。用于实验室的水质标准需要达到表4中的要求。公猪站实验室的纯水应每年应至少检测4次。纯水机应当制定专门的维护保养程序,并且定期对滤芯进行检查和及时更换。
05
精液稀释与分装
精液的稀释比例,在专业化的公猪站是根据精液分析系统,对原精的密度和活力进行评估后生成,这样可以避免人为因素造成的误差,可以提高公猪的利用效率。实验室人员需要根据当日的精液生产量,提前准备精液稀释液。
一般情况下是总头份数乘以每头份的体积,再多加 5%~10%,以满足精液制作及后续的使用。配制好的稀释液只能当天使用,不要使用过夜的。准确称量纯净水和稀释粉是非常重要的,否则产生的偏差会改变溶液的渗透压。稀释前,需连续混合稀释液1小时以使稀释液成分稳定。
稀释液需保持 35℃恒温(刚采集的精液温度约为 37~38℃,精液质量评估过程温度会下降 2~3℃)。如果采用多级稀释,那么稀释液温度可能会与推荐的有所不同。
稀释后的精液应置于 35℃水浴锅,或立即进行分装。分装前需取样在显微镜下观察,确保精子细胞没有受到影响;然后轻柔搅动精液以防精子聚沉。如果有大量混精需要处理,建议边搅动边分装。从精液到达传递窗直到分装,大约需要 20min。
分装后的精液需冷却降温,精液分派或者运输前应冷却 4小时。精液应在可控环境(17℃)下储存、包装和密封。恒温( 17℃)运输,必要时可使用电子温度记录器检测温度。
06
生产区域的卫生条件
实验室保持干净、卫生对精液质量非常重要,因为环境中的细菌、灰尘等对精子细胞有杀伤作用,会造成例如损害顶体,活力受损,凝集/结块,造成精子活力的下降。实验室所有清洁和消毒程序都需要遵循下面的步骤:
1) 去除实验室台面、设备表面的所有灰尘、杂物。
2) 使用清洁剂去除油渍、残余精液等有机物,清洁剂必须对精子无害且无挥发性。
3) 用刷子、海绵或布擦洗表面。
4) 用一次性纸巾擦干。
5) 消毒杀菌,杀死残留的微生物。
6) 每次清洁后对所使用的工具进行消毒或更换。
7) 清洁从净区工作到脏区。
8) 清洁从顶部工作到底部。
每天对使用的所有设备进行一次清洁、消毒,包括精子分析系统、计算机、键盘、移液器、显微镜等,在下班后使用紫外灯消毒也是一种有效的办法。
总 结
良好的公猪站实验室管理的目的是生产高品质的精液。通过建立正确的工作流程,避免生产区域受到污染;通过培训和前期准备,精确地评估精液。此外,高品质的实验室水质以及始终保持实验室干净卫生,都是实验室管理的核心要素。
铁骑力士公猪站
铁骑力士现代公猪站位于绵阳市三台县,于2017年年底建成并投入使用。2017年11月从加拿大加裕育种公司引入优秀的种猪1000头,其中公猪200头。公猪站采用世界一流的工艺设计与设施设备,内部采用全漏缝地板、自动料线、自动环控设备,全舍采用密闭设计以保证生物安全。
良好的基因将为公猪站提供源源不断的良种,在提高公猪育种性能方面,铁骑力士在2019年5月与加裕公司达成优质种猪繁育战略合作,未来将在联合育种、生产管理、市场推广等多方面展开全面合作,进一步提高铁骑力士育种水平,保持核心群种猪性能与加拿大核心群性能同步。
除此之外,铁骑力士不断引进先进的理念、技术和设施设备,全力将基因优势发挥到最大。铁骑力士公猪站生产精液的实验室设备全部从法国进口,更好地保障精液品质和猪精安全。目前公猪站可稳定供应猪精,除内部使用外,还运送到贵州、江西、陕西等地区的客户猪场,为客户的猪群性能改良作出贡献,同时降低农户猪场的综合生产成本,每头育肥猪可降低饲养成本100元以上,有效增加猪场的经济效益。
猪的世界也拼爹
铁骑力士公猪精液
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