[摘要] 以动物源性食品为检测基质，对兽药多残留估量 中样品前处理和检测技术进行总括，综述了常用兽药氟喹诺酮类(FQs)、磺胺类(SAs)等药物多残留估量 的国内外文献，并对兽药多残留估量 的研究趋势进行了展望。

[关键词] 兽药；多残留；前处理；检测

民以食为天。随着人类物质文明和精神文明的连续提高，人们对食品的质量和安全请求越来越来高。兽药在降低动物发病率和死亡率、促进其生长、改善畜产品品质等方面起来 了重要作用，但由于在畜牧业生产中广泛使用亚治疗剂量药物、违禁药物及不遵守停药期等导致动物源性食品中兽药残留超标。近年来，人们对长期低水平摄入兽药残留所致的各种慢性、远期、蓄积性和诱导人类致病菌产生耐药性等问题反常 关注，如何能够快速、简捷、低价格检测痕量兽药多残留是亟待解决的课题。

1样品前处理

动物源性食品中兽药残留的主要特点是样品基质复杂，残留水平低，干扰物质多。因此，样品的分离纯化是估量 中最费时、劳动强度最大的步骤。经典的样品前处理方法，操作繁琐、需大量有机溶剂、处理时间长、筛选性差，已不能很好的满足现代兽药多残留估量 的发展请求，一些更简便、有效的样品前处理技术便应运而生。

1．1 固相萃取(SPE) 固相萃取利用吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，使其与样品基体、干扰物质分离，然后通过洗脱液洗脱或加热解吸附，分离和富集目标物。与传统的液一液萃取相比，SPE不需要大量有机溶剂，不产生乳化现象，可净化很小体积的样品。SPE是目前兽药残留估量 中样品前处理的主流技术，可直接与高效液相色谱(HPLC)、气相色谱(GC)等连接，实现样品净化富集自动化，但SPE易将共存干扰物萃取出来，且富集倍数有限。刘芄岩等摘 用ENVl一18柱对猪肉中3种磺胺类(SAs)和7种氟喹诺酮类(FQs)药物残留进行净化，用水洗掉大量杂质，再用4％氨/甲醇洗脱目标物，该法检出限、归收率高。刘嫒等测定了鸡蛋中4种FQs药物残留，摘 用C18固相萃取柱净化样品，各种沙星的归收率在82．0％一95．7％范畴。Ester Car0等以恩诺沙星为模板分子合成分子印迹聚合物作固相萃取吸附剂，对尿样和动物组织样品中的恩诺沙星和环丙沙星摘 用分子印迹固相萃取柱和Oasis HLB柱联用进行净化，HPLC法测定。

1．2 基质固相分散(MSPD) 基质固相分散是由Staren Barker等人在1989年首次提出的一种快速样品处理技术。MSPD是将样品与填料一起混合研磨，使样品平均 分散于固定相颗粒表面，制成半固态后装柱，然后根据“相似相溶”原理筛选合适的洗脱剂洗脱。该技术浓缩了传统样品前处理中匀浆、组织细胞裂解、提取、净化等多个过程，避免了待测物在这些过程中的缺失 。MSPD技术提取净化效率高，养猪论坛 ，耗时短、节约溶剂、样品用量少，是目前农残、兽药残留比较有前途的前处理方法；但研磨的粒度大小和填装技术的差别会使淋洗曲线有所差异，方法不易标准化。奉夏平等摘 用MSPD—PTV／GC／MS法测定动物源性食品中氯霉素，将样品与Cl8一起研磨平均 后装柱，正己烷淋洗，可除去脂类物，乙酸乙酯洗脱待测物，方法检测限为5 p9／g。耿志明等摘 用MSPD—HPLC法测定鱼肉中7种SAs药物残留，正己烷淋洗，甲烷洗脱。Crescenzi等摘 用MSPD—SPE法对牛肝中克仑特罗进行前处理。

1．3超临界流体萃取(SFE) 超临界流体萃取是以超临界状态下的流体为淋洗剂，利用该状态下的流体具有气体的渗透能力和液体的溶解能力分离混合物。SFE技术处理样品速度快、效率高、几乎不消耗溶剂，其缺点是实验条件的筛选和优化比较困难，萃取体系可筛选性差，装置价格昂贵，不适合水样估量 。Pensabene等摘 用SFE技术对鸡蛋中的氯霉素残留进行提取与净化，归收率为77．4％一86．6％。Dost等通过填充塔超临界流体萃取一常压化学电离质谱法检测了牛奶中SAs药物残留。

1．4凝胶渗透色谱(GPC) 凝胶渗透色谱的固定相为凝胶颗粒，随流动相的挪动，分子量大的分子沿凝胶颗粒间的间隙挪动，在色谱柱中保留时间较短，分子量小的分子扩散来 凝胶颗粒内部，在色谱柱中保留时间较长，从而来 达净化和富集组分的目的。GPC法可使肉类样品中的兽药与脂肪等杂质分离开来。李锋格等建立了羊肠衣中氯霉素残留的估量 方法，样品用GPC和SPE法净化，GC一负化学源一MS法检测，该法简便省时，自动化程度高。

1．5免疫亲和色谱(IAC) 免疫亲和色谱以抗原抗体的特异性、可逆性免疫结合反应为原理，其基本过程是将抗体与惰性基质偶联制成固定相后装柱，当含有待测组分的样品通过IAC柱时，固定抗体筛选性地结合待测物，其它不被识别的杂质流出IAC柱，经洗涤除去杂质后将抗原一抗体复合物解离，洗脱待测物即可。IAC对待测物有高效、高筛选性的保留能力，适合复杂样品极稀组分的净化与富集。IAC技术是目前净化与富集效能最强的样品处理技术，但尚处探索阶段。王建平等用IAC—GC／MS法检测猪尿中的沙丁胺醇和克伦特罗，他率先在国内用SAL抗体制备出可多残留提取净化沙丁胺醇与克伦特罗的IAC柱。Lawrence等将PEAs样品提取液先经弱阳离子交换柱再过IAC柱后，用HPLC法直接测定。

另外，还有一些高效样品提取净化技术和专门的自动化提取装置，如微波辅助提取、固相微萃取、分子印迹技术、吹扫一捕集、膜分离、磺化萃取、样品消解萃取以及制备色谱等在兽药残留前处理中亦有一定应用。但新的样品提取净化富集方法并不能完全代替传统的方法，很多情景下新技术需要在经典方法配合下进行，以此在兽药残留估量 中发挥更大的作用。

2兽药残留检测技术

目前，常规的兽药残留检测方法有仪器法、微生物法和酶联免疫法。仪器法准确度高，但操作烦琐、仪器昂贵、试剂消耗量大；微生物法检测灵敏度低、准确性差、检测速度慢；酶联免疫法虽可以快速、高灵敏度、高准确检测样品，但不能同时检测多种兽药。

2．1 兽药残留主要检测方法介绍高效液相色谱(HPLC)是目前大多数兽药残留的常规估量 方法，HPLC分离效能高、估量 速度快、检测灵敏度高。但HPLC缺乏可满足兽药残留估量 请求的通用型检测器。紫外检测器(uV)最普及，对一样 兽药均有响应，但灵敏度不如荧光检测器(FLD)高；光电二极管阵列检测器(DAD)可同时接收整个光谱区的信息，在色谱峰流出同时进行每个瞬时 的动态光谱扫描并快速摘 集信号，得来 三维图谱，信息量和灵敏度大大增加 ；质谱是兽药残留估量 很好的检测器，可对其结构进行确证，但价格昂贵。

高效薄层色谱(HPTLC)在兽药残留快速挑选 检测方面应用十分广泛。HPTLC斑点原位扫描定

量、定性和高效分离材料改变了常规薄层色谱法(TLC)在灵敏度和重现性方面的不足。HPTLC法简捷、快速辨论率可与HPLC相比美。

超临界流体色谱(SFC)是目前较新的分离估量 技术，是以超临界流体作为色谱流动相，可估量 较低温度下分子量大、热不平稳化合物和极性较强的化合物。它兼顾了HPLC和GC的优点，可与大部分HPLC和GC的检测器连接。许多在HPLC和GC上需经过衍生化才能估量 的兽药残留，均可用SFC直接测定。但缺点是仪器价格昂贵，还存在一些问题没有解决。

免疫估量 (IAs)技术是以抗原与抗体的特异性、可逆性结合反应为基础的估量 技术。IAs特异性强、灵敏度高、方便快捷、估量 容量大、成本低且安全可靠，已在大批量样本中某些兽药残留的快速挑选 性检测和常规估量 技术测定困难的兽药估量 中占据主流地位。我国已成功研制出基于免疫估量 技术原理的生物芯片检测系统，该系统可用于肉类中兽药残留的快速检测。

近些年，许多发达国家对动物源性食品中兽药最高残留限量规定越来越低，兽药残留估量 对象、样本数量的大大增加 ，迫切需要发展简捷、快速、灵敏，能同时处理测定大批量样品的兽药多残留估量 技术。单纯的波谱、色谱等估量 手段已不能很好适应这些请求，联用技术兼分离、定性和定量于一体，可扬长避短。常见的联用技术有TLC—MS、LC—MS、LC—MS—MS、SFC—MS等。LC—MS现已进入实用阶段，其灵敏度较FLD高一个数量级，能对纳克级兽药残留进行检测和结构确证。国内外将LC—MS联用技术用于兽药残留特别是多残留估量 起步不久，而LC—MS—MS联用技术在兽药多残留估量 中尚很少应用。建立动物源性食品中药物多残留的检测技术，是兽药多残留估量 研究领域的一个重要发展趋势。

2．2同类兽药多残留检测方法 国内外文献中对FQs、SAs药物研究颇多。FQs一样 都有荧光特性，可直接用HPLC—FLD法进行检测，而SAs荧光性差，可摘 用柱前衍生荧光法进行检测。有报道使用HPLC—FLD法检测血浆和尿液中4种FQs类药物残留。Posyniak等研究了HPLC—FLD法估量 动物组织中FQs类药物残留量。Maudens等对蜂蜜中12种SAs用HPLC一柱前衍生荧光检测器进行估量 。有报道对动物源性食品中10种SAs使用柱前衍生，HPLC—FLD法检测，归收率大于64％，检测限大于1μg／kg。

另外，摘 用HPLC—UV法检测FQs和SAs的报道也很多。侯霞等使用快速分离柱LC—uV法测定了猪肉中7种FQs兽药残留，加标归收率在95％～l04％之间。Han—wen Sun等摘 用毛细管电泳一DAD法对7种FQs进行了估量 ，平均归收率为72％～93％。有报道用HPLC—UV法测定了动物肌肉组织中7种残留的SAs药物。宋永青等用HPLC—uV法，同时测定肉中5种SAs药物残留，检测限5μg／kg。

2．3 多类兽药残留检测方法不同类的兽药一样 极性不同，化学性质也不同，使得同时提取、净化、检测多类兽药残留比较困难，该类文献目前不多，主要是对一些抗生素的检测。如Schneider等摘 用HPLC—FLD法同时检测鸡肉中5种FQs和3种四环素类兽药，检测限0．5～5 n9／g。George Stub—bings等摘 用离子交换固相萃取柱一HPLC法对动物组织中的SAs、咪唑类、FQs等药物进行检测，归收率53％～l04％。刘芃岩等使用SPE—HPLC—DAD法同时对猪肉中SAs和FQs类残留进行估量 ，检出限3．4～9.0μg/kg，归收率69%~104%。杨洁等建立了动物源性食品中5种SAs和3种四环素族抗生素残留的HPLC—DAD法，归收率范畴为70％～92％。有报道用HPLC—UV法测定动物组织中的已烯雌酚、呋喃唑酮、SAs药物残留，归收率89．2％~98．6％。