【关于亚硝酸盐的饲料卫生问题】
王春林 于炎湖 齐德生

    1亚硝酸盐卫生研究的意义

　　近年来，饲料卫生问题引发的事故连续发生。疯牛病、二英、多氯化联二苯、β－兴奋剂等事件已造成严重后果，不仅影响饲料工业和食品工业发展，更为重要的是，由于饲料中有毒物质危害畜禽健康，从而最终影响人类健康和环境。1999年5月29日，国务院已颁布实施《饲料和饲料添加剂治理 条例》，这是我国有关饲料的第一部权威性的法规。其中已明确提来 饲料的安全性问题。我国配合饲料、浓缩料、添加剂预混料产量已分别来 达5526万吨、886万吨和138万吨，产量居世界第二位（1998年）。但对配合饲料质量统一抽检，合格率仅为89.7％,其中猪配合饲料抽样平均合格率为89.7％,鸡为89.1％,鸭为88.9％,特种动物为86.4％。不合格主要表现在：①饲料营养成分不足；②饲料中部分卫生指标超标。

　　饲料是动物的“粮食”，也是人类的间接食品。因此，饲料的质量和安全直接关系来 肉、蛋、奶、鱼等养殖业的高效生产和动物产品的安全卫生。目前，世界各国均很器重饲料卫生与安全。我国已于1992年颁布饲料卫生标准，但随着饲料工业蓬勃发展的需要，该类标准也涌现一些问题，表现在规定范畴太窄，诸如只规定了猪和鸡的配合饲料、预混合饲料及部分饲料原料的卫生指标，而对其它畜禽饲料及浓缩饲料未作请求。同时饲料卫生指标检测方法滞后，还不能满足饲料工业质量观测的需要。

　　饲料中的有毒有害化学物质——亚硝酸盐（Nitrites）的答应量标准及测定方法亟待进一步改进。目前的国家标准仅仅限于鱼粉及猪、鸡配混合饲料，品种单一，而且针对的动物种类少，在其它卫生标准修订的同时，亚硝酸盐卫生标准也迫在眉睫。这将有助于我国饲料卫生标准体系的进一步完善和规范，促进我国饲料工业的健康发展。

    2国内外亚硝酸盐卫生研究概况

    2.1亚硝酸盐的来源

　　硝酸盐广泛存在于饲料、食品和环境中，它本身基本上是无毒的，当还原成亚硝酸盐时便有毒。硝酸盐主要蓄积在植物体内，而且含量幅度变化很大。它不仅与植物的种类、品种、植株部位及生育阶段有关，而且还与外界环境条件如土壤肥料、水分、温度、光照等密切相关。不同种类的蔬菜，其新鲜可食部分中的硝酸盐含量差异很大，以均值计，由高来 低为绿叶菜类(2859mg/kg)、白菜类(1548mg/kg)、根茎类（630mg/kg）、鲜豆类（413mg/kg）、瓜类(264mg/kg)、葱蒜类（193mg/kg）、茄果类（112mg/kg）。一些牧草和饲料作物如玉米、狼尾草、石茅高粱以及燕麦草、苜蓿，在一定条件下均可能蓄积硝酸盐。植物中硝酸盐还原酶（Nitratereductase）在亚硝酸盐蓄积中被认为是关键原因。在转为氨态氮前，硝酸盐第一 还原为亚硝酸盐（NO3－→NO2－→N2O→NH2OH→NH3）。植物在短期洪涝时硝酸盐含量增加 ，阴天或光照不足时也可造成光合作用减弱，造成氮的富集。另外，大量施用氮肥、土壤中缺钼、过施除草剂或病虫害也会造成硝酸盐的积存 。

　　饲料中硝酸盐转化为亚硝酸盐，可发生在动物摄食硝酸盐以前（体外转化），也可发生在摄入体内之后（体内转化）。自然界中很多细菌和真菌都含有硝酸盐还原酶，这类微生物种类很多，广泛存在于土壤、水等外界环境中，也存在于动物的胃肠道和口腔等器官中。因此，只要条件相宜，硝酸盐便可大量地还原为亚硝酸盐，引起动物中毒。

    2.2人的亚硝酸盐卫生

　　硝酸盐和亚硝酸盐非人体所必需，摄入过多对人体产生危害。亚硝酸盐中毒可导致高铁血红蛋白血症，严重者可致死。硝酸盐可以被人口腔、胃和肠道内

细菌还原成亚硝酸盐，因而硝酸盐和亚硝酸盐同被认为是致癌物质——亚硝基化合物（NOC）的前体物质。食品卫生学中对NOC的研究较为深入。世界卫生组织（WHO）和联合国粮农组织（FAO）于1973年规定，人体摄入硝酸盐的日答应值（ADI）为3.60mg/kg体重；亚硝酸盐的ADI为0.13mg/kg体重，但又分别于1994年和1996年两次对ADI值作修订,硝酸盐和亚硝酸盐分别为3.7mg/kg和0.06mg/kg(以NO3－和NO2－计)。由此可见,亚硝酸盐已经引起人类足够器重。

　　人类食品中，主要来源为蔬菜，其余部分来自腌卤制品或烟熏肉品类。亚硝酸钠已作为合法的添加剂用于食品工业中，并制定了相应的答应量标准和卫生指标检测方法。

    2.3动物的亚硝酸盐中毒

　　含亚硝酸盐的饲料引起畜禽中毒的事件历史上早有报道。畜禽亚硝酸盐中毒（Nitritepoisoning）问题在国内外研究得比较早也比较多。早在1895年，美国Mayo就报道过牛食 了猪舍遗址上种的玉米引起因素不明的中毒。1923年Newson报导美国西部科罗拉多州有短角牛食 了燕麦干草（干草因下雪受潮）后死亡。Bradley（1940）对燕麦干草作了化学估量 ，发觉其中硝酸钾含量高达2.5％～7％之多。在动物中，如牛、马、羊、猪、驯鹿、鸡、番鸭、犬等均有过亚硝酸盐中毒的报道，其因素大多为饲料和饮水中的硝酸盐及亚硝酸盐引起。饲料中尚无含亚硝酸盐的添加剂，但饲料原料品质控制不严或饲料产品污染均可能造成其中亚硝酸盐含量超标。　　在水产养殖中，亚硝酸盐氮对鲑科、科、草鱼、罗非鱼以及虾类的毒害也有报道，并可造成急性、亚急性和慢性中毒。亚硝酸盐对罗氏沼虾和欧洲鳗鲡的安全浓度分别为1.38mg/l和2.66mg/l。

　　反刍动物（牛、羊）亚硝酸盐中毒国内外报道较多。常态情景下，反刍动物摄入的硝酸盐在瘤胃微生物作用下还原成亚硝酸盐，进而很快还原为氨被利用。但如果牧草或饲料中含硝酸盐或亚硝酸盐较高，或瘤胃pH值和微生物群发生变化时，常常发生急性亚硝酸盐中毒。单胃动物摄入的硝酸盐常态情景下在肠道上部吸取 ，很少形成亚硝酸盐，但在胃酸不足或胃肠疾病时，肠道细菌可上行引发中毒，但并不多见，常见的为饲料中亚硝酸盐引起的急性或慢性中毒。

　　鉴于禽类硝酸盐和亚硝酸盐引发的中毒问题，国内外研究较少，但有不少中毒病例的报告，而从饲料的角度研究亚硝酸盐对鸭的毒性作用还未见报道。国内已有樱桃谷鸭、番鸭因食拌入饲料的烂菜叶或饮被污染的水而引起中毒的报道。Архилов（1989）研究认为，每千克禽用饲料中硝酸盐和亚硝酸盐的最高答应水平，配合饲料相应为200mg和5mg、草粉为800mg和10mg、饼粕为200mg和10mg、青草为200mg和10mg；每升含硝酸盐45mg以上，亚硝酸盐1mg以上的水，家禽不能饮用。Birnbreier（1996）研究认为，蛋鸡和火鸡饮水中亚硝酸盐应不超过60mg/l和30mg/l。Atef.M等(1991)对家禽硝酸盐及亚硝酸盐的药物毒理学研究掩饰,硝酸钠(4.2g/kg日粮)和亚硝酸钠(1.7g/kg日粮)可以阻碍鸡生长，导致高铁血红蛋白血症以及红血球计数、血清中GPT、GOT、肌酸酐和尿素氮的改变。Men’Kin（1993）在肉鸡日粮中添加0.1％的亚硝酸钾显然减少日增重,饲料转化效率降低。

　　动物的试验性亚硝酸盐中毒包括瘤胃灌注、静脉注射、经口投入（通过饲料或饮水）、腹腔注射等多种形式。不同的给药途径对动物造成的影响不同。动物对亚硝酸盐危害的敏锐 性有很大的种间差异，猪最敏锐 ，依次为马、牛、羊。绵羊经瘤胃注入20g亚硝酸钾后，2h内血浆中亚硝酸盐浓度达最高（Sinclair等，1967），然而同样剂量经饲料摄入则不造成影响。通常认为，“亚硝峰”在动物单一大剂量投入后4h～8h涌现（Deeb和Sloan，1975）。Q'Harn和Fraser（1975）估量 牛的硝酸盐中毒剂量（LD50）在45mg/kg～226mg/kgB.W变动；Bradley等（1940）报道硝酸盐的LD50为74mg/kg。Bartik.M(1981)认为牛和绵羊亚硝酸钠经口中毒剂量为100mg/kg,猪为75mg/kg～80mg/kg，豚鼠为90mg/kg。也有试验掩饰，猪一次内服亚硝酸钾12.2mg/kg～19.8mg/kgB.W即能发病,而21.3mg/kg以上剂量则可使猪死亡，其LD50为70mg/kg～75mg/kg。

    2.4亚硝酸盐的危害

　　硝酸盐及亚硝酸盐对动物引起的危害，主要表现为动物的急性和亚急性中毒。临床症状为唤 吸加强，心率加快，肌肉震颤，衰弱无力，行走摇晃，皮肤及可视粘膜涌现紫绀。体温下行，严重者发生阵发性惊厥或昏迷，甚至死亡。病了解剖可见血液凝固不良，呈黑红色或咖啡色。胃肠粘膜多有充血，心肌、气管有出血点，全身血管扩张，肝、肾淤血肿大。而慢性中毒表现

多种多样，如摘 食量下行，增重迟缓，精神萎靡。妊娠动物受胎率低，分娩无力。动物涌现腹泻，VA的缺乏和甲状腺肿。长期积存 可能涌现胃部和肝部的肿瘤（胃癌和肝癌）。硝酸盐及亚硝酸盐导致畜禽的慢性损害已经引起人们关注。畜禽生产性能的下行是最直接的经济缺失 ，而因毒物的残留或代谢转化为更具危险性的亚硝基化合物将直接危害人类健康。

　　现在认为亚硝酸盐引起动物中毒是由于两方面的影响，其一是影响心血管系统，NO2－可将血红蛋白中的亚铁离子氧化为三价铁离子，从而形成正铁血红蛋白，导致组织缺氧；其二是影响神经系统，表现为脑组织缺氧，引发神经症状。常态时健康动物体内的MHb量只占Hb总量的0.7％～10％，少量的NO2－入血可通过自身还原机制解毒，但NO2－进入过多，则可涌现贫血样缺氧，MHb量达30％～50％，可造成全身组织反常 是脑组织的急性损害，加上NO2－盐的扩张血管作用，生猪行情，伴以外周循环衰竭，使组织缺氧越来越严重，进而涌现唤 吸困难，神经机能紊乱。当MHb来 达60％～70％以上时，则可导致动物迅速死亡。

    3完结语

　　饲料中亚硝酸盐规定的卫生标准项目过少，看来进一步完善和拓宽饲料原料、饲料和动物种类有关标准将是今后工作的一个方向。

　　对于亚硝酸盐的检测方法，有部分学者也作了一些探讨。20世纪80年代中期澳大利亚科学家Michael.W等提出了高效液相色谱方法。现行应用较多的仍为紫外分光光度法和比色法。我国1991年制定了饲料中亚硝酸盐的测定方法。食品中也分别于1985年制定和1996年修订了亚硝酸盐的检测方法。鉴于饲料中所用方法与食品中（1985年版）方法基本相同，建议饲料中该方法预以修订。于村（1999）对食品中亚硝酸盐检测方法85版和96版进行比较，认为96版法所用试剂掩蔽性好，归收率高，精密度也较高。