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铁兰32:通过“后生元”技术进行黏膜免疫构建多重保护屏障,从而阻断非洲猪瘟感染研究分析

来源: 2022-05-18 16:51:24| 查看:

    自2018年合正生物实验室采用微生物手段来对 阻断非洲猪瘟感染的相关研究。铁兰32团队开始研究使用动物肠道有益菌群,以“后生元”技术合成发酵产物对抗非洲猪瘟。研究结果表明,对于像非洲猪瘟这样的有多层囊膜结构的病毒来说,首先动物是通过多种机制、防线来抵御外来病原菌的侵袭。第一道防线即我们所知的皮肤、分泌液、黏膜(眼结膜、支气管黏膜、肠黏膜、生殖泌尿道黏膜)等,其如城墙般将病原菌阻挡在外。第二道防线为白血球与巨噬细胞,当病菌入侵动物身体时,巨噬细胞产生吞噬作用,局部会有发炎反应产生。第三道防线即为B细胞和T细胞,具有全身、专一性、记忆性的特性。
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    而大多数的病毒都是从黏膜进入体内,进而发病,因此有效保护好黏膜是阻绝病毒感染的关键点。动物体内70%的免疫细胞在肠道,肠道的健康状态对免疫力的提升至关重要,而益生菌的代谢产物是调控动物肠道健康最直接的物质。

  在爱尔兰国立科克大学病毒实验室研究小组联合山东合正生物最近一次的动物实验(2021年10月18日),实验室攻毒数据如下:

1.动物分配
实验使用了46种ASFV毒株,共计60头实验猪参入实验,平分为三组,每组20头实验猪,攻毒计量均为3.5 LOG10 TCID50。组1设置饲喂合正生物“后生元”技术生产的产品3Day后,进行48小时攻毒。组2设置为攻毒48H后,开始持续饲喂后生元。组3设置为正常饮食,不添加后生元,并攻毒48H。以此为参照组。
2.实验环境
每组实验猪只完全隔离饲喂,固定饲喂人员,实验用猪均为无毒、无病症生猪,猪群同种。
3.样本收集、鉴定
 ◆咽拭子、粪便样本、血液病毒检测
0-15day每日采集实验猪只的咽拭子及粪便样本进行荧光PCR测定,从第15-30day,每三天采集一次,实验过程中每三天定期对猪只进行血液检测。
4.实验过程
  实验前三天正常饲喂,仅组1添加合正生物“后生元”技术生产的产品,第4天开始进行48小时攻毒操作。
组1:至实验结束后,实验猪只无一出现发病症状,无一死亡。
组2:在攻毒结束后,在第6天开始饲喂合正生物“后生元”技术生产的产品,该组分别在11、13、14天出现死亡情况,减员三头,发病猪只第9天出现发热情况,体温最高至38.9,食欲减少,偶见耳尖发红,死亡猪只解剖后可见淋巴结肿大出血,脾脏部分发黑,第16天CT值逐渐下降,猪只进食、体温恢复正常,至实验30Day,再无新增死亡。

组3:攻毒结束后,第8天出现发热症状,体温最高至42.3,伴随食欲不振、呕吐、便稀,第10天出现死亡两头,仅表现为高热症状。第12天死亡四头,表现为高热及鼻腔血样分泌物。13天死亡六头,表现为高热消退,皮下红紫、血样下痢,鼻腔血样分泌物。第14天死亡六头,表现与13天一致。第16天最后两头实验猪死亡,抽取死亡猪只6只进行解剖,可见淋巴结肿大出血、肠系黏膜出血,脾脏充血肿大质脆,皮下出血呈紫色。

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图:1-30天实验过程中ASFV核酸CT数值

5.实验结论
后生元技术可有效预防ASFV,对于治疗早期已感染猪群,预后良好。

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图:饲喂本产品后,IgA抗体含量明显上升,在8小时左右,与对照组(未添加产品)IgA抗体含量差距巨大。

   “后生元”是指具有生物活性的微生物的细菌体成分或微生物代谢产物。“后生元”中包含着菌体在裂解后释放出来的生物活性物质,例如:磷壁酸、肽聚糖及其衍生多肽、细胞表面蛋白、维生素、短链脂肪酸、有机酸、无细胞上清液等营养物质。自2013年后,从体外实验,动物实验到临床试验,涉及“后生元”的研究项目数量呈现快速增长的局面。“后生元”具有明确的化学结构、安全的剂量参数,目前已发现“后生元”在抗炎、维护肠屏障、肥胖、免疫调节、高血压、心血管疾病以及癌症等方面的作用。另外,“后生元”具有很好的吸收性、代谢性和机体分布性。研究显示,“后生元”成分易于被肠道吸收,菌体细胞破壁后释放的代谢物可以直接与小肠上皮细胞接触,可快速形成肠道黏膜免疫,合正生物专家以此为着手点,筛选菌种,并使用自身核心诱导驯化技术,使菌株功效增强、功效靶向更清晰、增强菌群生存能力和稳定性,以达成预期产物代谢。后续采用在线逆境调控发酵技术,对驯化后可产生非洲猪瘟病毒抑制成分的菌群进行发酵生产。数据表明,合正生物通过“后生元”技术所生产的有效成分可以阻挡非洲猪瘟病毒、标记病毒、杀灭病毒、包裹细胞、预防非瘟感染。

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   合正生物于2019年开始进行国内田间应用,至2021年末,已有332家猪场参入应用。参与猪场从海南到黑龙江,覆盖全国区域。数据显示,证实“后生元”技术对早期发病猪场可有效控制,中期脏腑未受损猪只可挽回。但其以预防非洲猪瘟表现更明显!在地处疫区的养殖场,实验饲喂产品后,两月内无一出现发病情况!“后生元”技术已由山东合正生物成功实现国内落地应用,产品不分族群限制,快速立即,从根本上解决非瘟危害,安全无副作用!每只猪仔从断奶到110kg出栏,饲喂费用每头45元左右。在非瘟大环境下,“后生元”技术为猪场实现安全生产提供了有力保障!

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  铁兰32含有的功能性组合物可与病毒鞘蛋白、棘蛋白结合,使病毒失去活性,降低病毒附着黏膜的机会,阻挡病毒通过黏膜进入体内造成感染、从而保护猪只不会发病。然而当ASFV不幸进入猪体内时,猪群还有办法挽回吗?答案是肯定的,铁兰32防非最后一道防线就是体内抑杀病毒。一直以来,大家都很关注万一非洲猪瘟病毒进入猪体腔内。而囊膜病毒的感染具有囊膜依赖性,如果能破坏病毒的囊膜,其感染力会大幅下降甚至丧失。因为囊膜上的触手被破坏,所以病毒哪怕跟单核巨噬细胞擦肩而过也不会发生黏附。囊膜病毒对脂质的敏感性比细菌高。。所以,饲料中添加铁兰32就能破坏进入口腔消化道里的病毒囊膜,使病毒丧失感染力。

 

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