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采血不用冷链!DBS干血斑技术在养猪领域的研究与应用

来源: 猪相关   2026-04-15 14:50:42   查看:  次

  一、技术溯源与核心原理

  DBS(Dried Blood Spot,干血斑)技术起源于1913年,由Ivar Christian Bang首创,最初用于葡萄糖浓度检测。1960年代,Robert Guthrie将其推广至新生儿遗传代谢病筛查,奠定了现代DBS技术的基础。其核心原理是将微量全血(通常50–100µL)滴于特制滤纸,自然晾干后形成稳定的血斑基质,可在室温下长期保存并用于多种分析检测。

  在兽医和养猪领域,DBS技术的应用相对滞后于人医领域,但近年来随着猪场疾病监测需求的增长,相关研究正在快速扩展。

  二、猪场病毒性疾病检测

  1.PRRSV(猪繁殖与呼吸综合征病毒)检测核心应用

  这是目前DBS在养猪业中研究最深入的应用方向:

  FTA卡DBS:早期研究使用Whatman FTA卡采集血液,用于PRRSV的RT-qPCR检测,与血清相比灵敏度达89%,同时可检测抗体和病毒核酸。

  普通滤纸DBS:最新研究(2026年,明尼苏达大学)证明,使用Whatman Grade 50普通滤纸从猪耳静脉采血制成的DBS,灵敏度可达100%,与血清完全一致,且成本仅$0.44/份。

  室温稳定性:DBS样本在室温下保存40天后仍有96%阳性率,6个月后仍有86%,且可成功完成ORF5病毒基因测序。

  公猪站监测:DBS已被广泛用于公猪站的PRRSV日常监测,是目前该场景下最主流的微创采样方式之一。

  2.非洲猪瘟(ASF)检测

  DBS在ASF检测中的应用是近年来的研究热点,尤其在热带和资源匮乏地区:

  研究证实DBS滤纸可用于ASFV抗体(ELISA)和病毒基因组(PCR)的双重检测,特异性良好,灵敏度相对适中。

  在热带条件下,DBS尤其适合替代液态血清,解决冷链运输难题。

  野猪种群的ASF监测中,DBS也被验证为可靠的野外采样工具。

  3.猪水疱病(SVD)抗体检测

  早在1982年,Hamblin和Hedger就报道了使用滤纸或吸墨纸干燥血液,通过ELISA检测猪水疱病病毒(SVDV)抗体,这是DBS技术猪病诊断中最早的记录之一。

  4.PRRSV抗体血清学检测

  2004年的研究证实,DBS滤纸圆片(filter discs)可用于PRRS抗体的ELISA检测,为猪场血清学监测提供了低成本替代方案。




  三、霉菌毒素暴露监测

  这是DBS在养猪业中一个新兴但极具潜力的应用领域:

  多霉菌毒素分析:研究验证了DBS可同时检测猪血液中的多种霉菌毒素生物标志物,包括黄曲霉毒素B1(AFB1)-赖氨酸加合物、赭曲霉毒素A(OTA)等,采用HPLC-MS/MS分析,多数霉菌毒素回收率超过80%。

  实际意义:霉菌毒素污染是猪场饲料安全的重大隐患,DBS技术可实现猪群霉菌毒素暴露水平的低成本、大规模监测,无需专业人员进行静脉采血。

  四、脂肪酸营养状态评估

  北卡罗来纳州立大学兽医学院的研究表明,DBS卡可用于评估猪的脂肪酸营养状态:

  使用Ahlstrom 226滤纸采集猪全血DBS,与传统冷冻血清/血浆样本相比,关键omega脂肪酸和多不饱和脂肪酸(PUFA)浓度具有良好的一致性。

  该方法为猪场营养管理提供了一种更便捷的监测工具,尤其适合长期跟踪研究。

  五、药代动力学(PK)研究

  DBS在兽医药代动力学研究中的应用正在快速发展:

  传统PK研究需要多次大量采血,对动物应激大、操作复杂;DBS微采样仅需几十微升血液,可大幅简化研究设计。

  最新研究(2025年)评估了DBS在兽医PK研究中的适用性,以美托咪定为例,75.6%的均值落在配对测量值±20%范围内,符合EMA指南要求。

  可穿戴自动采血系统结合DBS技术,已能在不干扰心血管参数的情况下按程序定时采集干血样本。

  六、重金属与环境毒素暴露检测

  DBS技术还被用于兽医领域的毒性重金属暴露诊断,为猪场环境污染监测提供了新工具。

  七、技术优势与局限性总结




  八、未来展望

  DBS技术在养猪业的应用仍处于快速发展阶段。随着非洲猪瘟等外来动物疫病威胁持续存在,以及全球猪场劳动力短缺问题加剧,DBS作为一种低成本、易操作、室温稳定的采样方式,有望在以下方向进一步突破:

  外来疫病早期预警:建立基于DBS的常规监测体系,提升猪场对突发疫情的响应速度。

  多病原联合检测:开发一张DBS卡同时检测多种病原的高通量方案。

  自动化处理:结合全自动DBS萃取系统(如CAMAG DBS-MS 500),实现高通量标准化检测。

  营养与健康综合监测:将疾病检测与营养状态、毒素暴露评估整合,实现猪群健康的全面画像。

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