环指蛋白4（RNF4）是一种转录因子，在小鼠的睾丸中表达很高，可与雄激素受体互作。有研究者研究显示，RNF4蛋白作为一种转录协调子，在颗粒细胞、卵细胞及精细胞的发育过程中发挥着重要的调控作用。因此选择RNF4做为影响繁殖性状的候选基因。
1材料与方法
1.1材料
猪的耳组织统一放在-20℃保存备用。
1.2方法
1.2.1引物的设计与合成
根据RNF4基因DNA序列设计引物，退火温度为59.1℃。
1.2.2 PCR扩增
PCR扩增后，可见937 bp的清晰目的条带。
1.2.3限制性内切酶酶切（RFLP）
PCR产物经内切酶酶切后，观察其分型结果。
2结果与分析
2.1猪RNF4基因的多态位点检测
当多态位点为TC基因型时，可见3个片段（937 bp+545 bp+392 bp）；当多态位点为TT基因型时，可见一个片段（937 bp）（图1）。
1材料与方法
1.1材料
猪的耳组织统一放在-20℃保存备用。
1.2方法
1.2.1引物的设计与合成
根据RNF4基因DNA序列设计引物，退火温度为59.1℃。
1.2.2 PCR扩增
PCR扩增后，可见937 bp的清晰目的条带。
1.2.3限制性内切酶酶切（RFLP）
PCR产物经内切酶酶切后，观察其分型结果。
2结果与分析
2.1猪RNF4基因的多态位点检测
当多态位点为TC基因型时，可见3个片段（937 bp+545 bp+392 bp）；当多态位点为TT基因型时，可见一个片段（937 bp）（图1）。
图1猪RNF4基因SacII酶切分型结果
2.2猪RNF4基因的基因型和等位基因的频率分布
发现RNF4基因经过SacII酶切后，在三个猪群中，C等位基因占优势（表1）。
2.3猪RNF4基因三个基因型与猪所有胎次产仔数性状的关联分析
通过在淮猪新品系Ⅱ猪群体中分析发现，CC型个体的所有胎次产仔数显著高于TT型个体1.044头（P＜0.05），C等位基因为优势等位基因。详见表2。
3讨论
RNF4基因在颗粒细胞、卵细胞及精细胞的发育过程中发挥着重要的调控作用，并发现，RNF4基因的CC基因型在所检测的3个猪群中占优势，这与其他研究者的结果是一致的。所以，在今后的猪的选育初期，可以参考选择RNF4基因的CC型个体作为一个选留参数，以期提高猪的产仔数。
