1．临床流行病学、病理学诊断 因为本病症状的多样性，临床诊断比较难题。当病猪表现有脑膜脑炎的神经症状，血液中单栌细胞护多 孕玄；右产；剖检见脑及脑膜充血、水肿，肝有小坏死灶：脑组织切片见有以单核细胞浸润为主的血管套和微细的化脓灶等病变时，可作出初步诊断。确诊需做菌体分离培养和动物接种试验。
2．细菌学诊断 采取病畜的血液、肝脏、脾脏、肾脏、脑脊液、脑组织及流产胎儿的肝组织等做触片和涂片镜检，如发现有呈“V”字形或“Y”字形排列的或并列的革兰阳性小杆菌即可初步确诊，但仍须采取病料进行细菌分离培养和鉴定，特别应作出本菌与红斑丹毒丝菌的鉴别，方能确诊。
3． 动物接种试验 取幼兔或豚鼠1只，用本菌的24h肉汤培养物1滴，滴人动物一侧结膜囊内，另一侧为对照，观察Sd。一般在接种24-36h内，泛起化脓性结膜炎。也可取0.5mL菌悬液(3 xl0“／mL)，于幼兔耳静脉打针，在3—5d内，幼兔血液内的单核细胞可上升40%以上。小鼠接种时，可选择10-20g小鼠1只，取0.2mL肉汤培养物于腹腔打针，在5天内将其杀死，可发现其肝、脾有坏死灶，如进行分离培养可找到本菌。
4．免疫诊断
(1)血清学诊断：用李氏杆菌IU.V三种0抗原做凝集反应，并与细菌学检查相结合进行，可以检查畜群中隐性和潜在感染的动物，但不能检出全部又，山木的动物。而且这种试验只有局于1：320的滴度时才能以为是特异性反应。但球蛋白的非特异性集结，能影响诊断。补体结合试验和间接血凝试验或因敏感性低，或因有非特异性而均不能使用。
(2)免疫荧光抗体技术：病料用福尔马林固定后，经二q恩烷包埋后作切片或用病料涂片，应用荧光抗体作直接法染色，李氏杆菌在组织切片内呈现具有荧光的球菌状与双球菌状形态特征。
5．鉴别诊断时 猪李氏杆菌病应与猪的伪狂犬病、传染性脑脊髓炎、猪血凝性脑脊髓炎等区别。
