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猪细小病毒的聚合酶链式反应(PCR )

来源:中国养猪网 2010-10-20 14:57:34| 查看:

 

  聚合酶链式反应(核酸探针技术)是20世纪80年代建立起来的一项体外酶促扩增新技术,可用于对疑似感染猪细小病毒的临床样品或哺乳动物细胞培养物的检测,这种方法敏感、特异、准确、目前,这一方法被广泛应用并建立了一系列检测方法。

1 985年,美国PE-Cetus公司人类遗传研究室Mullis等人发明了具有划时代意义的聚合酶链式反应,使人们梦寐以求的体外大量扩增核酸片段的愿望成为现实,之后该技术渗透于生物学科的每一个分支。其用于猪细小病毒病的诊断大大提高了诊断的敏感性和特异性,尤其对实验室检测细胞系的污染更为实用和重要。该方法在今后将会得到更广泛的应用,不过,由于PCR技术需要PCR仪等设备,使得该方法在临床上的应用受到了一定的限制。华中农业大学赵俊龙等根据已报道的猪细小病毒基因组序列,设计并合成了1对寡核苷酸引物,成功地从猪细小病毒感染的组织和细胞中扩增出445bp片段,建立了用于猪细小病毒感染检测的PCR方法,该方法可以检测出10 - 4TCID50的病毒含量。利用该方法对临床上24份流产病料进行检测,查出阳性16份,而同时利用血凝抑制试验检测只有10份阳性。结果表明该试验建立的PCR诊断方法灵敏度更高、特异性更强。

 

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