回肠炎又称猪增生性肠炎,是影响保育猪和育肥猪生产性能的重要肠道疾病。其病原为胞内劳森菌。肠道疾病不仅影响猪的福利,还会增加抗生素使用量,并给集约化养猪生产系统造成重大经济损失。据估测,在最常见的猪传染病中,回肠炎可给每头感染猪造成0.50~1.00欧元的经济损失。这一数字看似不大,但考虑到感染面广、亚临床病例多、生长速度和饲料利用率下降具有隐蔽性,其群体损失往往被低估。回肠炎之所以“被低估”,核心在于患病猪缺乏特异性临床症状,常见表现仅为腹泻、生长速度放慢和饲料利用率下降;一旦发生亚临床回肠炎,甚至不会出现临床症状。发现疾病以及快速、准确的诊断,是确诊亚临床或临床回肠炎的前提,也是采取有效治疗和预防措施、最大程度减少损失的基础。本文根据保育猪和育肥猪的回肠炎——一种被低估的疾病_王晶晶.pdf的文献进行总结分析。
一、临床表现与病理诊断
除非特异性临床症状外,患病猪可能出现宏观和/或微观的典型组织学病变。急性回肠炎时,回肠黏膜和肠壁可见卡他性炎症或出血,黏膜褶皱增大。慢性肠炎的特征是肠道绒毛和隐窝上皮细胞被未成熟的增生性上皮细胞替代,导致回肠和空肠壁明显增厚。这些病变提示,回肠炎并非单纯“拉稀”问题,而是肠道上皮更新和屏障功能受损,进而影响营养吸收和生长。
胞内劳森菌是一种需要复杂营养才能培养的细菌,只能在细胞培养液中培养和存活,猪感染后引发回肠炎。因此,检测时通常不进行胞内劳森菌分离,而是直接对组织样本进行非特异性染色,或用聚合酶链式反应检测感染组织、食糜和粪便样本。与其他诊断方法相比,PCR通过扩增特定核苷酸序列能够产生更特异和更灵敏的结果。实时定量PCR检测发现,患病猪回肠组织病变的严重程度与同一头猪粪便中胞内劳森菌基因组当量浓度之间存在正相关性。HE评分用于反映HE染色后可见的组织学损伤,评分范围为0~28,粪便中胞内劳森菌含量与HE评分呈正相关。此外,利用未免疫猪或免疫猪的平均日增重测得的临床影响情况,与PCR检测到的粪便中胞内劳森菌浓度相关,这使qPCR成为诊断猪回肠炎的首选方法。在猪群水平上,通过酶联免疫吸附测定检测血清中的特异性抗体有助于确定感染时间,但该方法不适用于该病的确诊。换言之,qPCR更偏向病原确认和载量评估,ELISA更偏向群体感染时间判断,两者不能互相替代。
二、控制与预防
如果发生急性回肠炎,猪场需要给患病猪服用抗生素,如大环内酯类和四环素类进行治疗。但是,考虑到要谨慎使用抗生素以及细菌对抗生素产生耐药性的威胁,控制和预防猪回肠炎的长期策略应基于猪场特有的免疫接种计划、生物安全和降低风险因素措施。这一思路很重要:抗生素可以解决急性临床问题,但不能替代群体层面的病原控制和风险管理。回肠炎的亚临床特征决定了仅靠治疗腹泻猪远远不够,猪场需要把监测、免疫、生物安全和饲养管理结合起来,减少病原传播和发病诱因。
三、欧洲田间流行数据
目前尚不清楚胞内劳森菌在欧洲猪场中的流行率及其影响,尚无数据说明由胞内劳森菌感染引起的肠道疾病发病率,因此有必要对欧盟各成员国进行调查研究,以确定该病原体在猪场中的流行情况。相关研究检测丹麦、法国、德国、西班牙、荷兰和英国的猪群。选择这些国家是因为其生猪存栏量占欧洲生猪总存栏量的三分之二以上,合计存栏1.005亿头,欧洲生猪总存栏量为1.5亿头。
研究结束时,对来自6个欧洲国家的144个猪群进行检测,以确定是否存在胞内劳森菌感染。从每个被检猪群中选择15头保育猪(10~25 kg)、15头生长猪(25~40 kg)和15头育肥猪(40~100 kg)采集粪便样本。利用qPCR计算得出的样本量,足以在约300头相同日龄的猪中以95%的置信度检测出胞内劳森菌,估计患病率为20%。考虑到猪肠道疾病发病史,从每个参试国家选择24个猪群用于试验。鉴于季节对猪回肠炎发病率的影响,从2017年10月开始采集粪便样本,前后横跨一年。试验猪随机选择,采样时猪是否腹泻并不影响其能否被选为试验动物。从猪的直肠壶腹部人工采集粪便样本,每头猪采样时均使用新的一次性手套,以避免交叉污染。用qPCR检测所有粪便样本中胞内劳森菌特异基因组片段的浓度。首批可用数据来自丹麦12个猪群、德国11个猪群、西班牙11个猪群、荷兰11个猪群、法国8个猪群和英国5个猪群,所用数据为2017年10月2日至2018年3月30日收集样本的检测结果。
来自参试猪群的粪便样本100%进行了胞内劳森菌检测。各猪群和各国家的粪便样本阳性率存在显著差异。丹麦猪群粪便样本中约48%呈胞内劳森菌基因组片段阳性;西班牙和法国阳性率较低,分别为20%和18%。总体而言,所有被检粪便样本阳性率为34%。英国和荷兰各猪群的粪便样本阳性率差异特别大。不同国家不同猪群之间以及不同国家猪群之间,不同年龄段猪群的粪便样本阳性率也存在很大差异。平均而言,30%的保育猪、42%的生长猪和33%的育肥猪粪便中检测到胞内劳森菌基因组片段。各年龄段中,丹麦保育猪粪便阳性率最高,达83%;英国、德国和西班牙生长猪粪便阳性率最高,分别为60%、57%和33%;荷兰和法国育肥猪阳性率最高,分别为54%和29%。这些中间结果在获得更多数据后还会完善。
四、结论与生产启示
由于在所有采样的猪群中都检测到了胞内劳森菌基因组片段,可以认为胞内劳森菌是一种普遍存在的病原体,至少在发生腹泻的猪群中是这样。要确诊胞内劳森菌感染,检测血清中的抗体至关重要,但只有在数据收集完成后才能对该病原体流行情况做出最终结论。胞内劳森菌感染需要利用qPCR检测腹泻猪粪便中的胞内劳森菌,或死后剖检的病理学病变才能确诊。最初结果表明,不同国家、不同猪群和不同年龄段猪在胞内劳森菌流行率上存在差异,可能原因和影响因素记录在调查表中,待数据收集完成后分析发布。
综合来看,回肠炎的防控应抓住三个关键点:
第一,认识到亚临床感染的存在,不能只关注腹泻猪;
第二,把qPCR粪便检测和组织病理学病变作为确诊依据,把ELISA抗体检测用于群体感染时间判断;
第三,急性病例合理使用大环内酯类、四环素类抗生素,长期则依靠猪场特有免疫接种计划、生物安全和降低风险因素措施。
欧洲数据进一步提示,胞内劳森菌在不同国家、猪群和年龄段中的阳性率差异明显,保育猪、生长猪和育肥猪均存在感染,防控不能只盯一个阶段。只有把诊断、监测、免疫和生物安全形成闭环,才能降低回肠炎对保育猪和育肥猪生产性能的隐蔽性损失。
一、临床表现与病理诊断
除非特异性临床症状外,患病猪可能出现宏观和/或微观的典型组织学病变。急性回肠炎时,回肠黏膜和肠壁可见卡他性炎症或出血,黏膜褶皱增大。慢性肠炎的特征是肠道绒毛和隐窝上皮细胞被未成熟的增生性上皮细胞替代,导致回肠和空肠壁明显增厚。这些病变提示,回肠炎并非单纯“拉稀”问题,而是肠道上皮更新和屏障功能受损,进而影响营养吸收和生长。
胞内劳森菌是一种需要复杂营养才能培养的细菌,只能在细胞培养液中培养和存活,猪感染后引发回肠炎。因此,检测时通常不进行胞内劳森菌分离,而是直接对组织样本进行非特异性染色,或用聚合酶链式反应检测感染组织、食糜和粪便样本。与其他诊断方法相比,PCR通过扩增特定核苷酸序列能够产生更特异和更灵敏的结果。实时定量PCR检测发现,患病猪回肠组织病变的严重程度与同一头猪粪便中胞内劳森菌基因组当量浓度之间存在正相关性。HE评分用于反映HE染色后可见的组织学损伤,评分范围为0~28,粪便中胞内劳森菌含量与HE评分呈正相关。此外,利用未免疫猪或免疫猪的平均日增重测得的临床影响情况,与PCR检测到的粪便中胞内劳森菌浓度相关,这使qPCR成为诊断猪回肠炎的首选方法。在猪群水平上,通过酶联免疫吸附测定检测血清中的特异性抗体有助于确定感染时间,但该方法不适用于该病的确诊。换言之,qPCR更偏向病原确认和载量评估,ELISA更偏向群体感染时间判断,两者不能互相替代。
二、控制与预防
如果发生急性回肠炎,猪场需要给患病猪服用抗生素,如大环内酯类和四环素类进行治疗。但是,考虑到要谨慎使用抗生素以及细菌对抗生素产生耐药性的威胁,控制和预防猪回肠炎的长期策略应基于猪场特有的免疫接种计划、生物安全和降低风险因素措施。这一思路很重要:抗生素可以解决急性临床问题,但不能替代群体层面的病原控制和风险管理。回肠炎的亚临床特征决定了仅靠治疗腹泻猪远远不够,猪场需要把监测、免疫、生物安全和饲养管理结合起来,减少病原传播和发病诱因。
三、欧洲田间流行数据
目前尚不清楚胞内劳森菌在欧洲猪场中的流行率及其影响,尚无数据说明由胞内劳森菌感染引起的肠道疾病发病率,因此有必要对欧盟各成员国进行调查研究,以确定该病原体在猪场中的流行情况。相关研究检测丹麦、法国、德国、西班牙、荷兰和英国的猪群。选择这些国家是因为其生猪存栏量占欧洲生猪总存栏量的三分之二以上,合计存栏1.005亿头,欧洲生猪总存栏量为1.5亿头。
研究结束时,对来自6个欧洲国家的144个猪群进行检测,以确定是否存在胞内劳森菌感染。从每个被检猪群中选择15头保育猪(10~25 kg)、15头生长猪(25~40 kg)和15头育肥猪(40~100 kg)采集粪便样本。利用qPCR计算得出的样本量,足以在约300头相同日龄的猪中以95%的置信度检测出胞内劳森菌,估计患病率为20%。考虑到猪肠道疾病发病史,从每个参试国家选择24个猪群用于试验。鉴于季节对猪回肠炎发病率的影响,从2017年10月开始采集粪便样本,前后横跨一年。试验猪随机选择,采样时猪是否腹泻并不影响其能否被选为试验动物。从猪的直肠壶腹部人工采集粪便样本,每头猪采样时均使用新的一次性手套,以避免交叉污染。用qPCR检测所有粪便样本中胞内劳森菌特异基因组片段的浓度。首批可用数据来自丹麦12个猪群、德国11个猪群、西班牙11个猪群、荷兰11个猪群、法国8个猪群和英国5个猪群,所用数据为2017年10月2日至2018年3月30日收集样本的检测结果。
来自参试猪群的粪便样本100%进行了胞内劳森菌检测。各猪群和各国家的粪便样本阳性率存在显著差异。丹麦猪群粪便样本中约48%呈胞内劳森菌基因组片段阳性;西班牙和法国阳性率较低,分别为20%和18%。总体而言,所有被检粪便样本阳性率为34%。英国和荷兰各猪群的粪便样本阳性率差异特别大。不同国家不同猪群之间以及不同国家猪群之间,不同年龄段猪群的粪便样本阳性率也存在很大差异。平均而言,30%的保育猪、42%的生长猪和33%的育肥猪粪便中检测到胞内劳森菌基因组片段。各年龄段中,丹麦保育猪粪便阳性率最高,达83%;英国、德国和西班牙生长猪粪便阳性率最高,分别为60%、57%和33%;荷兰和法国育肥猪阳性率最高,分别为54%和29%。这些中间结果在获得更多数据后还会完善。
四、结论与生产启示
由于在所有采样的猪群中都检测到了胞内劳森菌基因组片段,可以认为胞内劳森菌是一种普遍存在的病原体,至少在发生腹泻的猪群中是这样。要确诊胞内劳森菌感染,检测血清中的抗体至关重要,但只有在数据收集完成后才能对该病原体流行情况做出最终结论。胞内劳森菌感染需要利用qPCR检测腹泻猪粪便中的胞内劳森菌,或死后剖检的病理学病变才能确诊。最初结果表明,不同国家、不同猪群和不同年龄段猪在胞内劳森菌流行率上存在差异,可能原因和影响因素记录在调查表中,待数据收集完成后分析发布。
综合来看,回肠炎的防控应抓住三个关键点:
第一,认识到亚临床感染的存在,不能只关注腹泻猪;
第二,把qPCR粪便检测和组织病理学病变作为确诊依据,把ELISA抗体检测用于群体感染时间判断;
第三,急性病例合理使用大环内酯类、四环素类抗生素,长期则依靠猪场特有免疫接种计划、生物安全和降低风险因素措施。
欧洲数据进一步提示,胞内劳森菌在不同国家、猪群和年龄段中的阳性率差异明显,保育猪、生长猪和育肥猪均存在感染,防控不能只盯一个阶段。只有把诊断、监测、免疫和生物安全形成闭环,才能降低回肠炎对保育猪和育肥猪生产性能的隐蔽性损失。


