dpi：接种后天数

　　猪圆环病毒2型（PCV2）是猪圆环病毒相关疾病（PCVAD）的主要病原体，可表现为全身、呼吸道、肠道和生殖系统症状。猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）可导致母猪繁殖障碍和生长猪断奶后呼吸道疾病。猪同时感染PCV2和PRRSV具有重要的临床意义，因为在现场病例中，PRRSV与PCVAD最常相关。

　　临床结果取决于PCV2和PRRSV的感染顺序。在临床条件下，PCV2和PRRSV感染的顺序有三种情况：
 

• PRRSV感染后感染PCV2

• PCV2和PRRSV同时感染

• PCV2感染后感染PRRSV

　　感染顺序对于预测临床结果至关重要，因为这样可以有效控制商业养殖场的PCV2和PRRSV感染。本研究的目的是比较三种不同感染顺序之间的临床结果和TNF-α水平：1）猪先接种PCV2d，然后接种PRRSV；2）猪同时接种PCV2d和PRRSV；3）猪先接种PRRSV，然后接种PCV2d，所有实验条件相同。


　　材料与方法

　　购买36头14日龄PRRSV、M.hyo和PCV2阴性猪。将猪分为6组（对照组、PRRSV、PCV2、PCV2-PRRSV、PCV2+PRRSV和PRRSV-PCV2），每组6头，每组隔离在单独的猪舍内。接种前14天（28日龄），PRRSV-PCV2组的猪鼻腔内接种3ml剂量的PRRSV2。接种后第0天（42日龄），PRRSV-PCV2、PCV2+PRRSV、PCV2和PRRSV组的猪鼻腔内接种3ml剂量的PCV2d。PCV2-PRRSV组猪同时鼻腔接种3mL PCV2d和PRRSV接种物，PRRSV组猪鼻腔接种3mL PRRSV-2接种物，阴性对照组猪鼻腔接种6mL未感染细胞培养上清。14dpi（56日龄）时，PCV2-PRRSV组猪鼻腔接种3mL PRRSV-2接种物，28dpi（70日龄）时处死猪。

　　在-14（28日龄）、-7、0（42日龄）、7、14、21、28（70日龄）dpi采集血清样本。尸检时采集每头猪的组织样本。每天监测猪的临床症状。在实验开始时（28日龄）和实验结束时（70日龄）记录个体体重。研究结束时，计算平均日增重（ADWG）。通过实时PCR确定基因组病毒DNA和cDNA拷贝数的量化。使用商用PCV2和PRRSV ELISA试剂盒检测血清样本中PCV2和PRRSV抗体的存在。使用商用ELISA测试检测TNF-α。通过评估每个肺叶，对肺部进行宏观病变评分的形态学分析。显微镜间质性肺炎的评分范围为0到4。淋巴细胞耗竭和炎症的评分范围为0到5。

　　结果

　　PRRSV-PCV2组猪在14至28dpi表现出轻度至中度呼吸困难、呼吸急促、嗜睡和厌食。PCV2+PRRSV组的猪在接种后的第14天表现出呼吸急促和明显的呼吸困难。这些猪在接种后的第21天开始显得倦怠，并从第21到第28天食欲减退。接种PRRSV后，猪出现轻度至中度呼吸道疾病，体温升高持续17-24dpi。仅接种PRRSV的猪出现呼吸道疾病。在70日龄（28dpi）评估体重，其中PRRSV-PCV2和PCV2+PRRSV组与对照组相比显著降低。因此，与单独的PCV2组和对照组相比，PRRSV-PCV2和PCV2+PRRSV组的ADWG在28到70日龄之间显著较低。

　　在14dpi到28dpi，PRRSV-PCV2和PCV2+PRRSV组血清样品中PCV2d DNA的数量显著高于PCV2-PRRSV和PCV2组。PCV2-PRRSV组血清样品中PRRSV cDNA的数量在28dpi显著高于PRRSV-PCV2、PCV2+PRRSV和PRRSV组，因为这是由于PRRSV感染的时间不同所致。PRRSV-PCV2、PCV2+PRRSV、PCV2-PRRSV和PCV2组之间的抗PCV2抗体水平没有显著差异。在感染-7至7dpi时，PRRSV-PCV2组的平均抗PRRSV抗体水平显著高于其余五组。在感染0dpi时，PRRSV-PCV2组的血清TNF-α水平显著高于其余五组。与PCV2组相比，PRRSV-PCV2、PCV2+PRRSV、PCV2-PRRSV和PRRSV组的宏观肺病变严重程度评分显著较高。PRRSV-PCV2和PCV2+PRRSV组均存在符合PCVAD的微观PCV2相关淋巴病变。PRRSV-PCV2、PCV2+PRRSV、PCV2-PRRSV和PRRSV组均存在符合PRRSV诱发的间质性肺炎的微观肺病变。

　　结论

　　本研究中，PRRSV-PCV2、PCV2+PRRSV和PCV2-PRRSV组的PCV2感染时间相同，但PRRSV感染时间在PCV2感染时间前后有所不同。因此，PRRSV感染时间相差28天。这些结果提供了科学证据，表明PCV2无法增强PRRSV的复制和病变。这与之前的体外研究结果相矛盾，在体外研究中，PCV2-PRRSV和PCV2+PRRSV组的肺泡巨噬细胞中PRRSV阳性细胞的数量减少。体内和体外研究结果之间的这种差异无法解释，需要进一步研究以阐明PCV2对PRRSV的增强作用。基于PCV2和PRRSV感染顺序的不同临床结果为养猪从业者和生产者提供了重要的临床信息。因此，有必要进行诊断分析，以有效控制商业养猪场的PCV2和PRRSV感染。我们的数据表明，在PRRSV和PCV2同时传播的农场，控制PRRSV是当务之急。

　　原文连接：https://umnswinenews.com/2024/09/06/importance-of-sequential-infection-order-of-porcine-circovirus-type-2-and-porcine-reproductive-and-respiratory-syndrome-virus-to-divergent-clinical-outcomes/

　　完整文章请见：https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2024.110156