介绍
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)一直是美国最严重的疾病。来自莫里森猪健康监测项目(MSHMP)的数据表明,10月至12月期间,PRRS病例呈增加趋势,此时也正值粪肥泵输喷洒于猪场附近土壤的时间。众所周知,在粪便和粪坑中可以发现PRRS病毒,但关于粪肥中存在的PRRS病毒能否通过粪肥喷洒到达地下水的数据却不多。因此,本研究的目的在于比较不同PRRS病毒毒株在明尼苏达州不同土壤类型中的渗透能力。
2材料和方法
为达到本研究的目的,我们使用了三种不同的PRRS病毒(RFLP 1-7-4、1-4-4和1-26-2),在MARC-145细胞中进行培养和滴定。总共使用了13种土壤,其中,6种来自养猪场周边,余下7种来自UMN农学部。我们设计并使用了一种垂直玻璃柱模型,每种土壤各取5g、10g和20g置于模型内,在底端放置滤纸。向土壤柱中加入足够的水,以湿润土壤、排除气泡,模拟田间条件。然后将含有病毒和水(1∶1 v/v)的溶液加入到玻璃柱中,直到溶液完全通过并开始滴落。然后,收集渗滤液并进行滴定。通过方差分析和多元线性回归对结果进行分析。
3结果
无论玻璃柱中加入的土壤量如何(5g、10g和20g),我们都能成功地从渗滤液中分离到三种毒株。对于1-7-4毒株而言,其滴度经水稀释后,从初始的6.50 log10降至3.83 log10 TCID50100uL(阳性对照)。该病毒可从所有5g土壤样品中分离到,13个10g的土壤样品中可于12个样品中分离到,13个20g的土壤样本中可于6个样品中分离到。
对于1-4-4毒株而言,其滴度经水稀释后,从初始的5.50 log10降至3.17 log10 TCID50/100uL。该病毒可从所有5g土壤样品中分离到,13个10g的土壤样品中可于6个样品中分离到,13个20g的土壤样本中可于3个样品中分离到。
对于1-26-2毒株而言,其滴度经水稀释后,从初始的5.17 log10降至3.50 log10 TCID50/100uL。该病毒可从所有5g、10g土壤样品中分离到,13个20g的土壤样本中可于11个样品中分离到(图1)。
4结论
1、各毒株都能渗透到所有测试数量和类型的土壤中。
2、病毒滴度与土壤量呈反比关系。
3、目前的研究结果与其它具有渗滤能力的病毒(如脊髓灰质炎病毒、回声病毒、柯萨奇病毒)的报道一致。
图1根据土壤类型和毒株划分的TCID50点状图