哪种采样方法更高效便捷且准确?
引言
对猪群进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)检测,以进行疾病监测和判断净化成功。
断奶监测的金标准是对猪群中的30-60头猪进行血清检测,这种方法耗时且需要培训,而且不是群体样本。
本研究探索了一种对仔猪来说更有效、应激更小的取样方法。本研究的目的是将绳结(rope knot,RK)口腔液体采样与已建立的方法进行比较。
方法与材料
采用3种取样方法,对15窝即将断奶的仔猪进行取样。
方法1:绳结采样(rope knot,RK)
一根15英寸的未漂白的绳子绑三次,形成了一根6英寸长的绳子,中间打了一个3.4英寸粗的结。将绳结置于保温灯下,每半小时检查一次,直到大多数绳结明显饱和(总共1.5小时)。收集绳结并放置在单独的袋子里。从每个袋子里倒出一毫升液体。如果无法做到,将10毫升的磷酸盐缓冲盐水(PBS)倒入袋子中,搅拌。然后将剩余的内容物合并为一个混合样本。倒出混合样本,并与15个单独的样本一起送检。
方法2:乳房擦拭物采样(Udder wipes,UW)
用8ml的磷酸盐缓冲生理盐水浸泡纱布垫(4x4“)。纱布沿着每头母猪的乳房擦拭15秒钟,然后收集在单独的袋子里。彻底搅拌,并倒出1毫升液体。然后将剩余的内容物合并为一个混合样本。
方法3:每窝5头猪的血清采样(serum sampling,SS)
血清按窝混合进行检测。最后完成采血,以避免交叉污染和防止仔猪在绳结采样前应激。
结果与讨论
15个样本绳结采样和血清采样全部一致,而15个样本中的13个乳房擦拭物和血清采样结果一致。使用磷酸盐缓冲生理盐水饱和绳结采样仍然可以得到与血清采样相匹配的阳性/阴性结果。混合绳结液的Ct值比单样本的平均值更低,因此在这种情况下,可以进行混合采样。血清采样的平均Ct值低于乳房擦拭物和绳结,在确定测试方法时应考虑这一点。绳结采样是有效的采样方法,据报道与金标准方法相似。乳房擦拭物和绳结具有较高的Ct值,在确定是否合并样品或检测指标时应予以考虑。
来源:李曼养猪大会论文集,作者Carly Bates