确定接种PCV2疫苗的最佳时间需要考虑下列因素:母源免疫(MDI)、仔猪免疫系统成熟度、PCV2感染动力学、免疫抑制。
猪圆环病毒在猪场主要表现两个阶段的问题,一是保育舍阶段的断奶后多系统衰竭综合症(PMWS),主要影响40-70日龄的仔猪,表现衰竭,慢慢消瘦死亡。另一个表现是中大猪的皮炎肾病综合症(PDNS),也会有少量中大猪表现多系统衰竭综合症。
调查发现,尽管我国绝大多数猪群接种了PCV2疫苗,但PCV2仍多在10~12周龄以后循环,少数猪场在哺乳期、保育期就有感染。本文主要讨论PCV2防控中免疫日龄的选择。
调查显示PCV2多在10~12周龄以后循环
ELISA检测结果显示PCV2多在生长猪阶段循环
硕腾猪病诊断实验室对2018年12月份至2019年8月份140家猪场的7606份血清样品,用ELISA方法调查了PCV2的抗体。所有猪场不同阶段PCV2抗体总体阳性率盒须图见图1。
图1 2018.12-2019.8,140个猪场各生产阶段的7606份血清检测结果(基于Synbiotic ELISA试剂盒)
qPCR调查显示10周龄以后PCV2感染场迅速增多
10个阳性场的4、10、16、20周龄196血清样品的qPCR检测结果显示,10周龄以后感染PCV2的猪场迅速增多:
图2阳性场及阳性样品比例
图3不同周龄PCV2阳性率变化
考虑到采样场大部分在14~21日龄免疫PCV2疫苗,可知我国猪群尽管都在免疫PCV2疫苗,但大部分猪群PCV2仍然在10周龄以后循环。究其原因,疫苗效力(抗原质量、抗原量、佐剂、批次差异、保存、接种质量等)和免疫程序的影响(母源抗体、PCV2循环时间等)是其中主要的因素。
免疫日龄最好是母源抗体最小,并在PCV2自然感染之前至少3周
多个研究发现母源抗体对仔猪接种PCV2疫苗后的免疫反应有干扰,甚至发现21日龄免疫时的母源抗体滴度和其免疫后28天的抗体滴度呈负相关(Yeonsu等,2014)。Maria等(2009)进一步研究发现,具有母源抗体过氧化酶单层免疫试验(IPMA)抗体值高于10.6log2(或中和抗体NA>8log2)的猪,能够完全抵抗口鼻接种105TCID50/mL(不产生病毒血症),而低于IPMA5.5log2(或NA<3.9log2)则会更易感。该研究同时发现,母源抗体IPMA≥10log2(或NA≥8.8log2)看起来会干扰免疫后的体液免疫反应,而IPMA<8log2(或NA<5.5log2)则不会。
考虑到ELISA和IPMA相关性的研究结果(Pireri等,2014;图4),为避免母源抗体的干扰,免疫时机可在ELISA母源抗体值在400~650之间进行(Synbiotics ELISA检测试剂盒)。母源抗体的消长评估可以通过检测多个阶段或单个阶段采样,检测ELISA抗体,然后结合被动免疫抗体的半衰期(大约为15天),来确定不同时间的大体母源抗体水平。免疫日龄最好是母源抗体最小,并在PCV2自然感染之前至少3周。
图4 ELISA抗体值和IPMA滴度的相关性(Synbiotics阻断ELISA试剂盒检测结果)
何时是仔猪接种PCV2疫苗的最佳日龄?
Salvador Oliver Ferrando等研究了对PCV2亚临床感染仔猪实施了不同的疫苗接种方案,并评估其效力。给3周龄、6周龄和10周龄猪只接种相同疫苗。另一对照组未接种疫苗。监测所有猪只,并于不同取样点采集2到25周龄猪只血样。在该研究中,3周龄和6周龄接种疫苗猪只的病毒学和血清学结果相近。这两种方案都有效:患病毒血症的猪只数量均显著低于未接种对照组。反之,猪只10周龄时开始出现PVC2病毒血症,接种PVC2疫苗为时已晚,该组感染猪只比例与未接种疫苗组没有显著区别。
因此,仔猪接种疫苗的最佳日龄应为发生自然感染之前,结合MDI低值和PCV2保护性免疫的发展情况来定(图5)。
图5确定仔猪接种PCV2疫苗的最佳时间
硕腾建议,PCV2疫苗成功免疫策略要分3步走
第1步:要想办法减少母源抗体带来的干扰。
第2步,评估生长猪群PCV2感染循环阶段和强度。基于免疫反应的特点,建议在感染发生3周前完成接种。
第3步,平衡母源抗体的干扰和PCV2循环时间,优化免疫程序。譬如,对于生长猪,综合考虑母源抗体干扰和PCV2循环时间及强度,建议在PCV2循环前3周完成接种。对于后备猪,建议在配种前完成2次接种。而种猪群的免疫则需根据PCV2感染压力和后代PCV2循环时间确定。
另外,需要提到的是PCV2疫苗免疫两次优于一次(Maria等,2008);在感染PCV2以后免疫PCV2疫苗,接受PCV2攻毒后,仍能显著降低PCV2的病毒血症(Shen等,2010)。