摘 要:猪衣原体病由鹦鹉热衣原体致病性菌株引起的一种慢性接触性人畜共患传染病,又称流行性流产、猪衣原体性流产。它引起睾丸炎、子宫感染和流产、肺炎、肠炎、心包炎、关节炎等多种病型,常因菌株毒理、猪性别、年龄、生理状况和环境因素的变化而出现不同症候群,对集约化养猪业危害相对严重。多年以来,由于抗生素滥用现象普遍存在,对于存在于猪群中的衣原体病菌有一定抑制作用,以至于虽然常年来衣原体广泛存在,但是没有引起大爆发。随着减抗无抗时代政策实施,猪衣原体病势必引起养猪业越来越多人的关注。本文就猪衣原体的病原性、流行状况、临床症状、病理变化、诊断方法等方面研究进行综述。
关键词:猪衣原体;流行状况;临床症状;病理变化;诊断方法。
1病原
衣原体(chlamydia)是一种比病毒大、比细菌小的原核微生物,直径只有0.3-0.5微米,原体为革兰氏阴性病原体,在自然界中传播很广泛。衣原体在生活周期中有初体和原体之分。初体是繁殖型,形体较大,直径0.9-1.0微米,结构疏松,无传染性。原体(又称原生小体)是成熟型,位于细胞外,呈球形,直径0.2-0.4微米,在感染细胞内以包涵体的形式存在,具有高度传染性。
传播机制:传染源排出的衣原体一般经生殖道、呼吸道等侵入易感动物,直接经菌血症阶段再定位于多种不同的组织和器官。受感染的动物在临床上是否保持隐性或引起疾病,主要取决于病毒的毒力、感染量、宿主的年龄和抵抗力。
2 流行状况
猪衣原体在我国流行广泛,笔者通过相关文献及实际检测汇总数据获得以下流行状况:
从上述数据中我们可以看出:猪衣原体病在全国范围内流行广泛,阳性率普遍集中在10%-50%左右,严重者可达70%以上。其中,根据掌握的检测数据,阳性检出率在50%以上(包括50%)的省市目前有广东、江西及黑龙江,黑龙江最高达到77.1%。
3 临床症状
不同年龄和性别的猪感染衣原体后,临床症状差别很大,常见的有以下五种病型。
3.1 流产型:公猪发生睾丸炎、附睾炎、尿道炎,睾丸颜色和硬度发生变化,腹股沟淋巴结肿大1.5-2倍,输精管有出血性验证。
母猪以头胎母猪发病率较高,严重时发病率可达40%-90%,流产、早产、死胎、木乃伊增多,产程延长,胎衣不下,部分流产胎儿有恶臭。产道炎、繁殖障碍、履配不孕,部分从未配过种的后备母猪也会有产道炎症。流产母猪子宫内膜出血、水肿,流产胎儿和坏死的新生仔猪头、胸和肩胛等部位皮下结缔组织水肿。个别母猪产后继发症会造成长期低烧,严重者衰竭死亡。
3.2 支气管肺炎型:主要发生于仔猪和生长猪。病猪体温急剧升高至41度左右,食欲废绝、不愿走动、打喷嚏、咳、喘气、腹泻等。1-2天后体温渐降,症状缓和,但4-7天后,第二次体温升高,伴随出现结膜炎、关节炎、睾丸炎等症状。
3.3 关节炎型:又称多发性关节炎,主要发生于仔猪。病猪体温升高、精神不振、食欲减退、呼吸急促、喘气、大便稀薄、全身肌肉僵硬,关节肿大、发热,有疼痛反应,步态不稳,一肢甚至四肢出现跛行。
3.4 结膜炎型:又称滤泡性结膜炎。可发生于不同年龄的猪,一般以幼龄猪明显。病猪眼结膜潮红充血呈水肿状,不断流泪,两眼同时患病。全身皮肤发红、皮温增加,2-3天后角膜出现不同程度浑浊。
3.5 肠炎型:病猪以腹泻为主,排出灰黄色或灰白色水样粪便。
4 病理变化
4.1 流产型:流产的胎儿体表有一层灰黄色或土黄色覆盖物,皮下结缔组织水肿,心脏和肺脏浆膜下点状出血,毛细血管呈扩张状态,腹腔积液,支气管内有淤血点。流产母猪子宫内膜出血,水肿,并有坏死灶。
4.2 支气管肺炎型:有结膜炎和浆液卡他性鼻炎、大叶性肺炎、腹膜炎等病变。肺脏水肿,表面有大量的小出血点或出血斑。肺的尖叶和心叶呈灰色。肺泡膨胀不全,伴有大量渗出物。细支气管内有大量出血点,有时出现坏死区,内积有脓样物质。
4.3 关节炎型:患肢关节周围充血和水肿,关节肿大。关节腔内充满纤维素样渗出液,杂有絮片。关节腔面有出血点。
4.4 结膜炎型:眼结膜充血,水肿明显,角膜浑浊、糜烂或溃疡。
4.5 肠炎型:肠系膜淋巴结肿胀充血,小肠和结肠呈卡他性炎。腹腔广泛性炎症,肠系膜发生粘连。脾脏肿大,表面有出血点。
5 诊断方法
5.1 显微镜检查法 无菌采集病畜的病变内脏、流产胎儿或各种分泌物,将所采集病料固定后,涂片,用Giemsa染色,可见EB呈现红色,RB呈现蓝紫色。用Stamp氏法染色,结果是在淡绿色背景的衬托下,衣原体呈现鲜红色。碘染色(Rice)法时,低倍镜下,鹦鹉热衣原体的包涵体由于不含有糖原不被着色。在荧光显微镜下观察,可见亮绿色边界清晰的圆形颗粒,柱状细胞内可见亮绿色包涵体。
5.2 荧光定量PCR法 通过设计特异性核酸探针,用于鹦鹉热衣原体的基因检测和多形态膜蛋白基因检测,能在1小时内快速、特异、直观的进行野毒检测。配合便携式诊断设备,可方便在野外进行衣原体野毒检测。
5.3 间接血凝(IHA)方法 华派生物工程集团有限公司通过多年积累,研发了可长期保存的冻干红细胞用于检测。应用IHA方法检测,灵敏度高、特异性好、操作简单、样品检测量大,可定量检测野毒抗体和免疫抗体等优点,更适合衣原体大范围检测工作。
5.4 细胞分离法 用于衣原体分离培养的常用细胞系有BGM、Hela、Vero和L细胞系。使用含5%-10%胎牛血清和对衣原体无抑制作用的抗生素的标准组织培养液培养细胞单层,然后接种,进行分离,但此种方法分离率与病料取样、保存等因素密切相关。
5.5 鸡胚分离法 将接种物匀浆0.4ml接种于发育良好的6-7日龄鸡胚卵黄囊内,37℃-38.5℃孵化箱内孵育。接种后3-10日内死亡鸡胚收获卵黄囊膜涂片镜检有衣原体原生小体。如果接种后无死亡,可再盲传3-4代后镜检。
5.6 酶联免疫吸附试验(ELISA) 较理想的ELISA方法为用特异性蛋白作为包被抗原,例如衣原体的外膜优势蛋白,即外膜主蛋白(MOMP)包被后用于抗体检测。
6 讨论
6.1 猪衣原体病存在于许多国家和地区,不仅从患有各种疾病的猪体内可分离到鹦鹉热衣原体,自临床表现正常猪体内也可分离到该病原。由衣原体引起猪发生流产、死胎的比率很高。猪发生流产、早产、弱产,新生仔猪发生衣原体性肺炎、肠炎导致围产期大批死亡,给养猪业带来重大损失。因此,研究和综合防控猪的衣原体病将是十分必要的,而且具有重大意义。
6.2 本病的临床症状与其它疾病有很多相似之处,例如繁殖障碍应当与乙脑、蓝耳、伪狂犬等疾病相区别;关节炎症状应当与猪副嗜血杆菌病、猪丹毒、链球菌等疾病相区别;呼吸症状应当与巴氏杆菌、猪流感相区别。所以在实际工作中,给本病的诊断和
治疗工作增加较大难度,但只要认真贯彻预防为主的方针,实施计划免疫,便能有效予以
防治。实践证明,用衣原体疫苗加强对适繁母猪的免疫是预防本病最有效最可靠措施。同时,在工作中定期进行抗体监测、疑似病例的抗原检测,更有利于猪场衣原体病的全局把控。
6.3 猪衣原体病不仅能够感染其它多种哺乳动物和禽类,同时也可以感染人类,属于人畜共患病,而且已被联合国列入潜在生物战剂。鉴于此病的危害程度,从事生猪养殖的从业人员自身防护和养殖场的消毒管理措施格外重要。病猪和带菌猪是主要传染源,猪场飞鸟的羽毛和粪便、鼠类也能成为传染源。所以,要加强生物安全综合防控,平时除定期对环境进行消毒,也要防止鸟类以及其它动物的误入。猪场一旦发现阳性病例要立刻隔离和
治疗,饲养人员要更加注意自身的防护。
6.4 在我国,鹦鹉热衣原体可引起猪的许多疾病,许多研究人员也从患有多种疾病的猪体内分离到多株衣原体。许多
养猪场,都从猪流产胎儿和胎衣中分离到鹦鹉热衣原体,而且从本文收集数据来看全国范围衣原体阳性率普遍在20%以上。随着农业农村部194号公告的落地,从2020年起“减抗无抗”从口号转变为行动,“减抗无抗”时代势必会给细菌性疾病的防控带来前所未有的挑战。而衣原体作为严重的人畜共患病,疫苗的免疫防控迫在眉睫。